Fosfoinositid-3 kinaz/akt fosforilasyonunun melatoninin nöroprotektif etkileri üzerindeki rolünün İn vitro ve İn vivo etkileri

Melatonin az ve çok gelişmiş organizmaların tümünde bulunan ve çok bilinen sirkadyen ritim kontrolünü sağlayan önemli bir hormonudur. Melatoninin circadian ritim regülasyonu dışında farklı biyolojik mekanizmalar ile de ilişkisi bulunmaktadır. Bunlar; yaşlılık, antioksidan temizlenmesi ve hücresel canlılık olaylarıdır. Bu projenin arka planına bağlı olarak, bütün bu biyolojik aktiviteler içerisinde ilgi hücresel canlılığa yönlendirilmiştir. PI-3K/Akt sinyal yolağının melatoninin nöroprotektif etkilerindeki rolü, PI-3K/Akt inhibitörü olan Wortmannin in yardımıyla, hem in vitro model olarak primer kortikal hücre kültüründe hem de in vivo model olarak MCAO hayvan deneyleriyle test edilmiştir. Primer kortikal hücre kültürü yeni doğan (1. gün-3.gün) Balb/C farelerinden alınarak yapılmıştır ve devamı olarak hipoksi- OGD deneyi kültürün 7. Gününde başlatılmıştır. Melatonin ve Wortmannin tedavileri hipoksi-OGD ve reperfüzyon aşamalarında eklenmiştir. In vivo model olarak da yetişkin C57BL farelerine 30 dakikalık MCAO serebral iskemi deneyi uygulanmıştır. Burada, Wortmannin MCAO'dan önce ve melatonin 30 dakikalık MCAO sonrasında enjekte edilmiştir. In vitro hücre canlılığı analizi mikroskopta çekilen canlı hücre resimlerinin değerlendirilmesiyle yapılmıştır. In vivo deneyi analizleri olan Nöron canlılığı analizi ve DNA parçalarına ayırma analizi sırasıyla cresyl violet boyaması ve TUNEL boyaması sonucu hesaplanmıştır. Bu çalışmanın sonucunda; in vitro melatonin grubunda hipoksi ve OGD deneyi sonunda aksonal uzantılar korunmuştur ve hücresel canlılık oranı 52, 46 % olarak bulunmuştur. Benzer olarak melatonin in vivo deney sonucunda önemli bir ölçüde nöronal canlılığı 94.06 % oranında arttırmıştır. Bu proje sonucunda melatoninin nöronal hayatta kalma oranını arttırdığı önemli bir ölçüde in vitro ve in vivo olarak ispat edilmiştir. Bundan başka, nöronal hayatta kalma oranındaki artışın Wortmanninin aynı deney grubuna eklenmesi sonucu normal seviyelere geri dönüşü görülmüştür. Bu buluş da PI-3K/Akt yolağının melatoninin nöroprotektif etkileri üzerinde çok önemli bir rolü olduğunu kanıtlamıştır.