Küçük molekül-aracılı insan HKH çoğaltımı ve HKH çoğaltımı için besiyeri geliştirilmesi

Multipotent ve kendini yenileme yetenekleri ile bilinen hematopoietik kök hücreler (HKH) bilhassa hematolojik kanser ve hastalıklarının tedavisi için HKH transplantasyonu için kullanılır. HKH transplantasyonu için alternative olan göbek kordon kanı (GGK) ve mobilize periferik kan (mPK), HKH sayısının azlığı ile sınırlıdır. Gecikmiş hematopoietik iyileşmeye sebep olan çift GGK unitesi kullanımına kıyasla HKH'lerin ex vivo çoğaltılması yaklaşımı, bu sınırlandırmanın üstesinden gelebilmek için daha umut verici bir terapötik yaklaşımdır. Biz daha önce HKH dormansi genlerinin susturulmasının in vivo HKH havuzunu arttırdığını gösterdik. Bu yüzden, HKH dormansi düzenleyicilerinin küçük moleküller kullanılarak hedeflenmesinin, ex vivo insan mPK ve GKK kökenli HKH çoğaltılması için kullanılabileceğini hipotez olarak ileri sürdük. En etkili hematopoeitik küçük molekülleri ve kombinasyonunu tanımlamayı ve bu küçük molekül veya kombinasyonu içeren iyi üretim uygulamaları (İÜU)-kalitesinde bir insan HKH çoğaltma besiyeri gelişirmeyi amaçladık. Bu çalışmada, HKH dormansi genlerini hedefleyen 35 hematopoietik küçük molekül kullandık. BML-20 ve TAME moleküllerinin hem mPK'da hemde GKK'ında HKH içeriğini arttırdığını ve hücrelerin tekrar hücre döngüsüne girişini tetiklediğini bulduk. Koloni oluşturucu birim analizi de moleküllerin çok-soylu olma potansiyelini arttırıcı etkisini teyit etmiştir. Ayrıca, BML-260 molekülünün TAME molekülüne kıyasla çoğalan hücrelerin canlılığı konusunda daha güvenilir olduğu bulunmuştur. Gen ekspresyon analizleri, BML-260 ve TAME moleküllerinin hücre döngüsü elemanlarının modülasyonunu sağlayarak insan HKH'lerini çoğalttığını göstermiştir. Diğer yandan, etkili olan kimyasal olarak tanımlanan HKH çoğaltma besiyerinin tanımlanması ile ilgili öncü sonuçlar göstermektedir ki; 10 percent fetal bovin serum, sitokinler (SCF, TPO and FLT-3), insülin-transferrin-selenyum (ITS) ve BML-260 molekülü eklenmiş RPMI 1640 besiyeri kimyasal olarak tanımlanmış insan HKh çoğaltma besiyeri için umut vaadedici olabilir. Bu bulgular, bu moleküllerin ve bu besiyeri içeriğinin, insan HKH çoğaltılması için geliştirilebileceğini ortaya koymaktadır.