Tiyoredoksin redüktaz enziminin gökkuşağı alabalığı solungaç dokularından saflaştırılması ve bazı ağır metal iyonlarının enzim aktivitesi üzerine etkilerinin incelenmesi

Bu çalışmada, Tioredoksin sistemi, tioredoksin redüktaz (E.C 1.6.4.5.; TrxR), tioredoksin (Trx) ve nikotinamid adenin dinükleotit fosfatından (NADPH) oluşur ve hücre büyümesine, apoptoz, antioksidan savunma, redoks sinyallemesine vb. katılır. Bu çalışmada, sitoplazmik TrxR enzimi, gökkuşağı alabalığı solungaç dokularından ısı denatürasyonu ve 2 ', 5'-ADP Sepharose 4B afinite kromatografisi teknikleri kullanılarak saflaştırılmıştır. Enzimin saflığı ve monomer moleküler ağırlığı, SDS PAGE ile belirlendi. NADPH ve 5,5 'Dithiobis (2-nitrobenzoik asit) için KM değerleri, enzimin substratları, Lineweaver-Burk grafiği ile hesaplandı. Optimom pH ve optimum iyonik şiddet değerleri sırasıyla 7.75 ve 300 mM olarak belirlenmiştir. Daha sonra Ni2+, Cu2+ ,Pb2+, Cd2+, Sr2+, Zn2+, Mg2+, Cr3+, Fe3+, Al3+ ve Ag+ metal iyonlarının enzim aktivitesi üzerindeki in vitro etkileri analiz edildi. İnhibisyon etkisi gösterenler için IC50 değerleri belirlendi ve Ki değerleri Cheng Prusoff denklemi ile hesaplandı.