Veterinerlik Doğum, Jinekoloji ve Suni Tohumlama Anabilim Dalı (disiplinlerarası)
Hatay Mustafa Kemal University4
Archived Theses
0
DOIs Assigned
0%
DOI Rate
Discipline
Tekelerde sulandırıcılara farklı oranlarda royal jelly (arı sütü) ilavesinin spermanın dondurulabilirliği ve fertiliteye etkisi
Bu çalışmada, Tris yumurta sarısı ve Tris soya lesitini temelli sulandırıcılara farklı konsantrasyonlarda arı sütü (AS) ilavesinin sperma kalitesi ve fertilite üzerine etkilerinin araştırılması amaçlandı. Sperma 5 baş Damascus tekesinden elektroejakülatör ile toplandı. Miktarı 0,5 ml'den fazla, motilitesi en az %70 ve ml'de en az 1,5 milyar spermatozoon yoğunluğuna sahip ejakulatlar birleştirildi ve 1x109/ml motil spermatozoon bulunacak şekilde sulandırıldı. Sperma 4 saat ekilibrasyon sonrasında payetlere çekilerek donduruldu. Fertilite değerlendirmeleri için intravajinal süngerlerle senkronize edilen 150 baş keçi, en iyi spermatolojik kaliteye sahip gruplarla transservikal olarak tohumlandı. Hayvanların gebelik muayeneleri tohumlamadan sonraki 21. ve 50. günlerde yapıldı. Sulandırılmış ve soğutulmuş spermada, Tris-YS sulandırıcısında motilite ve membran bütünlüğü en düşük %1 AS grubunda saptandı (P<0.05). Soğutulmuş spermada anormal spermatozoon oranı bakımından deneme gruplarında %1 AS grubu en yüksek iken %0,25 ve 0,50 AS grupları en düşük olarak belirlendi (P<0.05). Sulandırma ve soğutma sonrasında osmolalite her iki sulandırıcı grubunda da AS oranı arttıkça belirgin şekilde azaldı (P<0.05). Tris-YS sulandırıcısında ekilibrasyon sonrasında membran bütünlüğü en düşük %1 AS grubunda saptanırken diğer gruplar benzer bulundu. Dondurup çözdürme sonrasında sulandırıcılarda %1 AS gruplarında en düşük motilite, canlılık ve membran bütünlüğü saptanırken %0,25 ve %0,50 AS grupları ile kontrol grubu benzerdi. Sağlam akrozom oranı bakımından Tris-YS ve Tris-SL sulandırıcılarında en yüksek oran %0,50 AS grubunda, en düşük oran %1 AS grubunda belirlendi (P<0.05). Dondurup-çözdürme sonrasında %0,50 AS ilaveli Tris-SL grubu, Tris-YS grubuna kıyasla daha yüksek sağlam akrozom oranına, %0,75 AS ilaveli Tris-YS grubu ise Tris-SL grubuna göre daha yüksek plazma membran bütünlüğüne sahip bulundu (P<0.05). Tris-YS ve Tris-SL sulandırıcılarında kontrol ve deneme grupları arasında gebelik ve embriyonik kayıp oranları bakımından fark bulunmadı (P>0.05). Sonuç olarak, Tris-YS ve Tris-SL sulandırıcılarına yapılan arı sütü ilavelerinin Damascus teke spermasının dondurulmasına sağlam akrozom oranı dışında bir alternatif üretmediği ve fertilite açısından olumlu bir etkisinin olmadığı kanaatine varıldı.
Kedilerde antimüllerian hormonun folikülogenezisteki rolü ve ovaryohisterektomi sonrası seyri
Yapılan bu çalışmada kedilerde antimüllerian hormonun folikülogenezisteki rolü ve ovaryohisterektomi sonrası seyrinin araştırılması amaçlandı. Çalışma, yaşları 5-48 ay arasında değişen, 3.070.5 kg canlı ağırlığında en az bir adet fertil östrüs gösteren 20 adet sağlıklı dişi kedide gerçekleştirildi. Kediler, seksüel siklus, yaş ve vücut ağırlıklarına göre sınıflandırıldı. Serum antimüllerian hormon (AMH), E2, P4, FSH ve LH seviyelerinin tespiti için operasyon öncesi (0.gün) ve postoperatif (p.o) 3 ve 10. günlerde kan örnekleri alındı. Ovaryum foliküllerindeki AMH ifadesinin tespiti immunohistokimyasal yöntemle gerçekleştirildi. Postoperatif AMH seviyelerinde operasyon öncesine göre bir azalma olduğu görüldü (p<0.05). Seksüel siklusun dönemi, yaş ve vücut ağırlığının AMH seviyesini etkilemediği görüldü. Postoperatif 3.günde serum FSH ve LH seviyeleri arasında negatif bir korelasyon tespit edilirken (p<0.01), AMH ve LH seviyeleri arasında pozitif bir korelasyon gözlendi (p<0.05). Serum E2 ile P4 seviyeleri arasındaki ise postoperatif 3.günde pozitif bir korelasyon saptandı (p<0.05). Postoperatif 10.günde serum E2 ve FSH seviyeleri arasında pozitif bir korelasyon tespit edildi (p<0.05). Serum AMH ve E2 seviyeleri arasında negatif korelasyon saptandı (p<0.05). Postoperatif 10.günde serum AMH ve FSH seviyeleri arasında ise negatif bir korelasyon tespit edildi (p<0.001). Serum E2 seviyelerinin p.o 3.günde, 0.güne göre azaldığı, ancak 10.günde operasyon öncesi düzeylerine yaklaştığı gözlendi. Serum P4 seviyelerinde ise p.o 3. günden itibaren bir azalma görüldü (p<0.05). Serum E2 değerlerinin östrüs ve diöstrüs döneminde benzer, anöstrüs döneminde ise daha düşük olduğu görüldü (p<0.05). Serum P4 değerlerinin anöstrüs ve östrüs dönemlerinde benzer, diöstrüs döneminde ise daha yüksek olduğu görüldü (p<0.05). Serum FSH değerlerinin p.o 3.günde, 0.güne göre arttığı; LH değerlerinin ise p.o 10.günde, 0.güne göre yükseldiği tespit edildi (p<0.05). İmmunohistokimyasal analizlerde AMH'nin ilk olarak primer foliküllerde üretildiği, antral folikül aşamasında ise en yüksek immunpozitifliğin olduğu tespit edildi. Tekal hücrelerde AMH immunpozitiflik görülmedi, ancak atretik foliküllerde hafif (+1) bir AMH immunpozitiflik görüldü.
Fare sperminin dondurulabilirliği üzerine ferulik asit, triptofan ve L-Glutamine'in etkisi
Sunulan çalışmada, fare spermatozoon hücrelerinin dondurulabilirliği üzerine %18 raffinoz+%3 yağsız süt tozu sperma sulandırıcısına ilave edilen farklı dozlardaki Ferulik asit (0.1mM, 1mM ve 10mM), Triptofan (5mM, 25mM ve 50mM) ve L-Glutamin (10mM, 50mM ve 100mM) etkinlikleri araştırıldı. Çalışmada %18 Rafinoz+%3 yağsız süt tozu kombinasyonu kontrol olarak tutuldu. Araştırmada 12-24 haftalık yaşta 60 adet CD-1 ırkı erkek fareler kullanılmıştır. Fareler biri kontrol ve dokuzu deneme grubu olacak şekilde 10 gruba ayrıldı. Her grup 6 adet fareden oluşturuldu. Fareler servikal dislokasyon yöntemi ile sakrifiye edilerek, kauda epididimislerden spermatozoa elde edildi. Kontrol grubu farelerden elde edilen spermatozoa, %18 raffinoz+%3 yağsız süt tozundan oluşan sperma sulandırıcısı ile sulandırıldı. Deneme gruplarına %18 raffinoz+%3 yağsız süt tozu sperma sulandırıcısına 0.1, 1 mM ve 10 mM ferulik asit, 5 mM, 25 mM ve 50 mM Triptofan ve 10 mM, 50 mM ve 100 mM L-Glutamin ilave edildi. Sulandırılmış sperma 10 dakika inkube edildikten sonra 0.25 ml'lik payetlere çekilerek sıvı azot buharında donduruldu. Dondurulmuş sperma 37oC'lik su banyosunda 30 saniyede çözdürüldü. Dondurma çözdürme sonrası sperma örneklerinin motilite, ölü spermatozoon oranı, plazma membran bütünlüğü, anormal akrozom oranı, HTF (Human Tubal Fluid) içerisinde 4 saat süresince motilite dayanıklılık, ve hücre apoptozu testleri yapıldı. Dondurma çözdürme sonrası kontrol grubu ile karşılaştırıldığında en yüksek motilite ve plazma membran bütünlüğü sırası ile %56.67±2.11 ve %77.83±0.87 ile 10 mM L-Glutamin grubunda elde edildi (P<0.05). Ayrıca, kontrol grubu ile karşılaştırıldığında en düşük ölü spermatozoon oranı ve anormal akrozom oranı ise sırası ile %26.00±1.46 ve %6.33±1.09 olarak 10 mM L-Glutamin grubunda belirlendi (P<0.05). Dondurma ve çözdürme sonrası motilite dayanıklılık (longevity) süresi, kontrol gurubu ile karşılaştırıldığında 4. saate kadar 10 mM ve 50 mM L-Glutamin grubunda belirlendi (P<0.05). Sperma örneklerinde apoptozun değerlendirilmesinde kontrol, 0.1 mM Ferulik asit ve 10 mM L-Glutamin grupları arasında önemli bir fark bulunmadı (P>0.05). Sonuç olarak, sperma sulandırıcısına 10 mM L-Glutamin ilavesinin dondurup çözdürme sonrası motilite, canlı spermatozoon, fonksiyonel membran bütünlük oranı, anormal akrozom oranı veya motilite dayanıklığını arttırdığı ve fare sperma dondurma sulandırıcılarında başarılı bir şekilde kullanılabileceği belirlendi. Anahtar kelimeler: Fare, dondurulmuş çözdürülmüş sperma, ferulik asit, triptofan, L-glutamin.
Entansif yetiştirilen halep keçilerinde üreme mevsiminde PGF2 alfa ve progesteron teöstrüs melli senkronizasyonu sonrası dondurulmuş sperma ile intraservikal ve laparoskopik tohumlamaların etkinliğinin belirlenmesi
Çalışmada, üreme mevsiminde Halep keçilerinde farklı Östrüs senkronizasyon yöntemlerinin etkinliği ile sentetik progesteron içeren intravajinal süngerlerle senkronizasyon sonrası dondurulmuş sperma ile yapılan suni tohumlama uygulamalarda tohumlama zamanı ve tohumlama tekniğinin fertilite üzerine etkisi değerlendirildi. Araştırmada yaşları 2-4 arasında değişen ve döl verimi problemi bulunmayan 160 adet keçi ve östrüslerin tespiti için yaşları 3-4 arasında değişen 12 adet arama tekesi kullanıldı. Suni tohumlamalarda dondurulmuş-çözdürülmüş ithal Saanen tekesi sperma payetleri kullanıldı. Deneme I'de bitkisel progesteron (BP), bitkisel progesteron+eCG (BP+eCG), çift doz PGF2α (PG), çift doz PGF2α+eCG (PG+eCG) ve sentetik progesteron (SP+eCG+PG; kontrol) olmak üzere 5 uygulama grubu yer aldı. Deneme II'de uygulama gruplarındaki keçilerin tamamına MAP emdirilmiş vajinal süngerler 11,5 gün süre ile uygulandı ve uygulama bitiminde eCG ve PGF2α enjeksiyonları yapıldı. Keçiler sabit zamanlı veya östrüs takibine dayalı olarak intraservikal ve laparoskopik yöntemle tohumlandı. Deneme I'de östrüs oranları bakımından en düşük değerler BP (%35) ve BP+eCG (%40) gruplarında tespit edildi ve gruplar arasındaki farklılık önemli bulundu (P<0.05). BP, BP + eCG, PG, PG+eCG ve SP+eCG+PG (kontrol) gruplarında tohumlamaları takip eden 21. gün plazma P4 düzeyleri ve 50. gündeki ultrasonografik muayeneye göre gebelik oranları bakımından 21. günde kontrol ve PG grubu en yüksek, BP+eCG grubu en düşük; 50. günde ise kontrol grubu, PG+eCG ve BP+eCG gruplarından yüksek iken en düşük gebelik oranı PG ve BP gruplarında kaydedildi (P<0.05). Deneme II'de gebelik oranı bakımından intraservikal ve laparoskopik yöntem ile sabit zamanlı yapılan ve östrüstan 12-16 saat sonra yapılan tohumlamalarda; en yüksek gebelik laparoskopik yöntem ile yapılan tohumlamalarda ve östrüsların belirlenmesinden sonraki 12-16. saatlerde tespit edildi. Sonuç olarak farklı östrus senkronizasyon protokollerinden östrüs oranı bakımından en yüksek başarı PG, PG+eCG ve SP+eCG+PG gruplarında saptanırken, en düşük östrüs oranları ise doğal bitkisel progesteron uygulanan gruplarda görüldü. İntraservikal tohumlamalarda 50. gününde en yüksek gebelik oranı SP+eCG+PG grubunda elde edildi. Gebelik oranı bakımından en yüksek oran tohumlamanın östrüslerin tespit edilmesini takiben 12-16 saat sonra yapıldığı laparoskopik yöntemle elde edildi. Anahtar kelimeler: Keçi, östrüs senkronizasyonu, dondurulmuş sperma, intraservikal, laparoskopik, suni tohumlama.