Acinetobacter psychrotolerans suşlarından izole edilen lipazın karakterizasyonları

Bu çalışmada, Acinetobacter psychrotolerans Xg1 ve Xg2 suşlarının lipolitik aktiviteleri Tween 20, Tween 80 ve Tributirin agar besiyerinde kalitatif olarak belirlenmiştir. Lipaz aktivite deneyi için Rhodamine B agar besiyeri kullanıldı ve her iki suşta pozitif sonuç verdi. Lipaz aktiviteleri, p-nitrofenil palmitat kullanılarak spektrofotometre ile kantitatif olarak ölçülmüştür. Xg1 ve Xg2 suşlarının lipaz aktiviteleri sırasıyla 0,14 ve 0,13 U dır. Xg1 suşunun zamana bağlı en yüksek enzim üretimi 24. saatte olurken Xg2 suşunun 48. saatte olduğu görüldü. Acinetobacter psychrotolerans Xg1 ve Xg2 suşlarının ekstraselüler lipazları karakterize edildi. Her iki suşun enzimlerinin maksimum aktivitesi pH 8 ve 30 oC?de görülmüştür. Hekzan, etil asetat, kloroform ve N,N dietil formamid organik çözücülerin varlığında yüksek stabilite göstermiş, izopropanol, asetonitril ve bütan-1-ol çözücüleri varlığında lipaz aktivitelerinde azalmalar saptanmıştır. Xg1 suşunun enzim aktivitesini FeCl3, CuCl2 ve ZnCl2 önemli ölçüde azaltmıştır. Xg2 suşunu ise CuCl2 ve ZnCl2 metal iyonlarının enzim aktivitesini azaltmıştır. EDTA ajanı, Xg1 ve Xg2 suşlarının ürettiği lipazın aktivitesini azaltırken, SDS neredeyse tamamen inhibe etmiştir. Xg1 ve Xg2 suşlarından elde edilen kültür süpernatantları ile sırasıyla, ultrafiltrasyon, jel kromatografi, SDS-PAGE ve aktivite çalışmaları yapıldı.