Kemik mikroçevre taklit biyobozunur doku iskeleleri ile ostjenik kök hücre farklılaşmaşı

Yüzeyin pürüzlülüğünün, topografisinin ve sertliğinin, bunun yanı sıra yüzeylerin kimyasal ve/veya biyokimyasal içeriğinin değişimi; doku mühendisliği alanında geliştirilecek yeni biyoprotezler için önemli olan hücre-yüzey, ara yüzey karakteristiğini ve hücresel davranışları etkileyebilmektedir. Bu sebeple bu tezde, kemik yüzey mikro-çevresinin taklidi amaçlanmıştır. İlk olarak, kalıp üretebilmek için, sığır femur yüzeyi polimetilsiloksan (PDMS) kullanılarak taklit edilmiştir. Biyobozunabilen bir polimer olan, poli (L-laktik asit) (BSM) doku iskeleleri kemik yüzeyini taklit edebilmek için bir kalıba dökülmüştür. Daha sonra, kemik morfojenik protein-2 (BMP-2) iskeleler üzerine yüklenmiş ve salım profili Enzyme-Linked Immunosorbent Assay (ELISA) ile in vitro koşullarda incelenmiştir. BSM iskeleleri, kemiğin doğal mikro-çevresine benzer iskeleler oluşturulması için hidroksiapatit (HA) ya da tip 1 kolajen (Col-I) ile modifiye edilmiştir. Modifiye doku iskeleleri Su Temas Açısı ölçümü, Taramalı Elektron Mikroskobu (SEM), X-Işını Fotoelektron Spektroskopisi (XPS), X-Işınları Kırınım Cihazı (XRD) ve Fourier Dönüşümlü Infrared Spektrofotometre (FTIR) ile karakterize edilmiştir. Karakterizasyon çalışmalarını hücre kültürü çalışmaları izlemiştir. Doku iskeleleri üzerine ekilen hücrelerin canlılığını analiz etmek için, MTT yapılmıştır. Doku iskeleleri üzerinde hücre çoğalmasını incelemek için Alamar Mavisi yapılmıştır. Modifikasyoların in-vitro koşullarda kontrollü ve indüklenmiş osteojenik farklılaşma üzerindeki etkisi, Alizarin Kırmızı, alkalin fosfataz aktivitesi analizi ve SEM EDAX testleri kullanılarak değerlendirilmiştir.