Döngel bitkisi (Mespilus germanica L., Rosaceae) meyvelerindeki polifenol oksidaz aktivitesinin karakterizasyonu

ÖZET Bu çalışmada, döngel bitkisi (Mespilus germanica L., Rosaceae) meyvelerinden hazırlanan ekstraklarda polifenol oksidaz (PFO) aktivitesi çeşitli biyokimyasal ve kinetik veriler açısından detaylı bir şekilde incelenmiştir. Katekol, 4-metil katekol, DOPA (dihidroksifenilalanin), DHPPA (3,4-dihidroksifenil propiyonik asit) ve epikatekin adlı fenolik substratlann oksidasyonunu etkin bir şekilde katalizleyen döngel PFO 0.96 mg protein/ml değerlerine kadar sabit bir artış göstermiş ve her bir substrat ile spesifik pH ve sıcaklık değerlerinde etkileşim sağlamıştır. Yapılan kinetik çalışmalar sonucunda döngel PFO in basit Michaelis-Menten kinetiğine uyduğu ve en yüksek derecede 4-metil katekol substratına ilgi duyduğu ve bu substrat ilgisinin sırasıyla 4-metilkatekol>DOPA>katekol>epikatekin>DHPPA şeklinde değiştiği gözlenmiştir. Ayrıca, kinetik verilerden elde edilen Hill grafiği her bir substrat için h<\ değerini vererek enzimin tek bir substrat bağlanma bölgesine sahip olduğu ve dolayısıyla kooperativite göstermediği tespit edilmiştir. Sistein, sodyum azid ve benzoik asit gibi genel PFO inhibitörleri enzim aktivitesini önemli derecede inhibe etmiştir. Tüm bu veriler, döngel meyvelerinde mevcut olan PFO m diğer bitki PFO aktivitelerinden oldukça yüksek olmasına rağmen benzer biyokimyasal ve kinetik davranışlar gösterdiğini desteklemektedir. Anahtar Kelimeler: Polifenol Oksidaz, difenolaz, döngel meyveleri {Mespilus germanica), DOPA, DHPPA IV