Sivrisinek öldürücü yeni bir suş olan Bacillus sphaericus ve toksin proteinlerinin tanımlanması ve karakterizasyonu

Yaklaşık 50 yıldan fazla süredir bacteriyel insektisitler sivrisineklerin kontrolü için kullanılmaktadır. Bazı B. sphaericus suşları sporulasyon aşamasında ikili toksinler olarak bilinen yüksek toksin olan proteinleri üretirler. Bu toksinler BinA (41,9 kDa) ve reseptör bağlanma proteini olan BinB (51.4 kDa) proteinlerinden oluşurlar. Bu proteinler sıtma, dang humması, sarı humma gibi hastalıkların taşıyıcısı olabilen sivrisinek larvaları üzerinde toksik etki gösterir. Bu çalışmada kapsamında sivrisinek larvaları üzerinde toksik etkiye sahip yeni bir Bacillus sphaericus (MBI5) suşu tanımlanmıştır. Yapılan laboratuvar biyoassay testlerinde test edilen MBI5 suşunun Culex pipiens larvalarını üzerinde yüksek düzeyde toksik olduğu, ancak pupa ve erginler üzerinde öldürücü olmadığı saptanmıştır. BinA ve BinB genleri pET-16b plasmidine klonlandı ve Escherichia coli DH5α.suşunda eksprese edildi. BinA ve BinB proteinlerinin aktif formları E. coli BL21 suşundan pürifiye edildi. Pürifiye edilmiş BinA proteinin LC50 değeri C. pipiens larvasına karşı 8. saatte 206,8 ng ml-1 olarak bulundu. BinB proteininde Culex larvalarına karşı bir toksik etki gözlenmedi. 1:1 oranında hazırlanmış BinA ve BinB protein karışımının Culex pipiens larvasına karşı 8. saatte LC50 değeri 379,7 ng ml-1 olarak kaydedildi. B. sphaericus (MBI5) suşunun, sivrisinek türlerinin larvalarına karşı etkili yeni bir bakteriyel insektisit olduğu ilk defa bu çalışma ile ortaya konulmuştur.