LRBA'nın potansiyel bir hedefi olarak PVRIG'in incelenmesi

Yeni T hücresi ko-inhibitörlerinin tespiti ve hücre içi regülasyonlarına yönelik mekanizmaların belirlenmesi, yeni immün kontrol noktası engelleme terapilerinin geliştirilmesi açısından büyük önem taşımaktadır. LRBA, kritik bir T hücresi ko-inhibitör reseptörü olan CTLA-4'ün hücre yüzeyine trafiğinin düzenleyicisi olarak önemli bir rol oynamaktadır. LRBA, internalize olmuş CTLA-4'ü hücre yüzeyine geri yönlendirerek ve lizozomal degradasyonunu engelleyerek immün homeostazı sürdürmekte ve otoimmüniteyi önlemektedir. Bugüne kadar, LRBA'nın CTLA-4 dışında diğer T hücresi ko-reseptör hedefleri belirlenmemiştir. Laboratuvarımızdaki önceki çalışmalarda, PVRIG adlı yeni bir T hücresi ko-inhibitör reseptörünün, LRBA geni silinmiş Jurkat T hücresi yüzeyinde belirgin bir şekilde düşük seviyede olduğu tespit edilmiştir. Bu tez çalışmasında, LRBA'nın CTLA-4'ü düzenlediği mekanizmalar gibi, PVRIG'i de benzer şekilde düzenleyip düzenlemediğini daha ayrıntılı olarak araştırmayı amaçladık. Bu amaçla, endojen PVRIG ve LRBA proteinlerinin fiziksel etkileşimini incelemek için ko-immünopresipitasyon deneyleri gerçekleştirdik. Ayrıca, LRBA'nın CTLA-4 ile bağlantı kurabilen PH-BEACH bölgesiyle PVRIG'e bağlanıp bağlanamayacağını anlamaya çalıştık. LRBA'nın Flag etiketli PH-BEACH bölgesinin, c-Myc/His etiketli tam uzunluklu PVRIG, kuyruksuz PVRIG ve sadece kuyruklu PVRIG yapısıyla birlikte ko-immünopresipite edilebildiğini gösterdik. Ancak, ko-immünopresipitasyon sonuçlarının spesifikliğini tam olarak doğrulayamadık. PVRIG ve LRBA arasındaki bağlanmanın başka tekniklerle araştırılmasına ihtiyaç vardır. Ayrıca, PVRIG proteininin glikolizasyona uğrayabildiğini gösterdik. Bu, PVRIG'in hücre içindeki genel fonksiyonu üzerinde etkili bir faktör olabilir. Bu çalışma, PVRIG'in LRBA tarafından regülasyonuna yönelik değerli bilgiler sağlamaktadır.