HK-2 hücre hattında okratoksin-a güdümlü toksisitede otofajinin katılımı

Okratoksin-A (OTA) k üf mantar taraf ından üretilen, bir çok çe şitli besin ve yemde bulunan ikincil metabolittir. OTA'nı n nefrotoksik ve karsinojenik etkileri önemli say ıdaki çalışmada g österilmi ş ve OTA olası insan karsinojeni olarak sınıflandırılmıştır. Otofaji, h ücre homeostazını n s ürdürülebilmesi için uzun ömürlü ya da kusurlu organel ve proteinlerin yıkılması i şlemidir. Bu calışmada, insan b öbrek proksimal tübül epitel hücreleri olan HK-2 hücreleri kullanı larak otofaji ve ona bağlı olan MAPK/ERK ve PI3K/AKT yolaklar ının OTA-g üdümlü toksisiteye olan kat ılımı incelenmi stir. OTA-teşvikli zamana ve doza bağlı otofajik aktivite, otofaji ile ba ğlantılı proteinlerden mikrotübül ba ğlayıcı LC3-I proteininin LC3-II'ye d önüşmesine, otofagozom ve asidik kesecikli yapı ları n oluşumuna bağlı olarak test edilmi ştir. 10 M dozlu OTA muamelesinin çok erken saatlerinde otofaji aktive olmu ştur. Bunun yanı nda 6 saatlik OTA muamelesiyle AKT fosforilasyonu artışı g österirken otofagozom oluşumu da azalmaya başlamıştır. Bu sonuçlarla paralel olarak, PI3K/AKT yolağı Wortmannin ile inhibe edildi ğinde otofagozom olu şumunda artış g özlemlenirken, MAPK/ERK yola ğı inhibasyonunun OTA-g üdümlü otofajinin düzenlenmesi üzerinde bir rol ü g örülmedi. OTA aynı zamanda denge durumundaki ubikitinlenmenin seviyesini azalttı . Bu sebeple otofajinin azald ığı ilerleyen saatlerdeki p62/SQSTM1 azal ımı ve asidik yapı lardaki artışı n yine OTA taraf ından tetiklenen ubikitin-proteozom yolağı ndan kaynaklı olabilece gini g österdi. Sonuçlar birlikte ele al ınd ığı nda, bu çalışma OTA'n ın HK-2 h ücrelerinde erken saatlerde otofajiyi tetiklerken, ilerleyen saatlerde PI3K/AKT yola ğının aktive olması yla otofajinin azalt ıldığını g östermektedir.