PD-L1/PDGFR-α targeted chimeric antigen receptor-natural killer cell therapy for chordoma

Nadir görülen bir neoplazma olan kordoma, çoğunlukla aksiyel iskelette görülen bir kemik tümörü türüdür. Güncel olarak kordoma tedavisi için Gıda ve İlaç İdaresi (FDA) onaylı kemoterapötikler mevcut değildir. Geleneksel tedavi seçenekleri arasında en blok rezeksiyon veya radyasyon tedavisi bulunur. Ek olarak, reseptör tirozin kinaz (RTK) inhibitörleri yaygın olarak tavsiye edilir. Bu nedenle, kimerik antijen reseptörleri tarafından RTK'lara karşı bir hedefleme stratejisi umut vericidir. Artan ilgi, kordomadaki kontrol noktası inhibitörlerini de değerlendirir ve birçok çalışma hem klinik öncesi hem de klinik aşamada cesaret verici sonuçlar vermiştir. Kimerik antijen reseptörü (CAR) ile kaynaşmış sitotoksik hücreler, immünoterapötik uygulamaların tamamlayıcı bileşenleridir. Bununla birlikte, hem tezgah tarafında hem de klinik kullanımda, faydalar, tasarım ve T ve doğal öldürücü hücrelere transferdeki zorluklarla sınırlıdır. Hedef, promotör veya yardımcı uyarıcı alan seçimleri, kimerik antijen reseptörü aracılı sitotoksik fonksiyonun kaderini belirler. Yine de, temel CAR yapısının kapsamlı bir şekilde araştırılması ve değerlendirmelere göre tasarlanması, işlevselliği garanti etmez. Bu nedenle, her bir CAR yapısı kendi optimizasyonunu ve klinik öncesi değerlendirmeyi gerektirir. Bu tezde, kordoma tedavisi için kombinatoryal CAR'ı hedefleyen bir PD-L1 ve PDGFR-α tasarlamak amaçlanmıştır. Lentiviral veya uyuyan güzel transpozon omurgalarına klonlanan PD-L1/PDGFR-α CAR yapısının ifade edilebilirliği, "transfekte edilmesi/aktarılması kolay" hücre hatları (İnsan ölümsüzleştirilmiş astrositler ve HEK293T hücreleri) ile gösterildi. Daha sonra, CAR vektörlerinin transferi için doğal katil hücre hatlarında transfeksiyon ve transdüksiyon optimizasyonları yapıldı. Hücre ve hücre yüzeyi içindeki CAR vektör transfer ekspresyon analizinin ardından değerlendirildi. Bulgularımız, vektör boyutunun, transfeksiyon/transdüksiyon yöntemlerinin, hücre hattı seçiminin ve tasarımın kendisinin CAR-NK hücre üretimi üzerinde derin etkileri olduğunu göstermektedir.