A systemic comparison of different chimeric antigen receptor (car) designs for retargeting of NK-92 cells against tumor antigens

Kanser immünoterapileri, bağışıklık sistemindeki hücrelerin tümörlere karşı olan saldırma gücüne odaklanır. Yakın geçmişte, B hücresi malignitelerinde bulunan CD19'a karşı Kimerik Antijen Reseptörleri ile modifiye T hücreleri (CAR-T hücreleri), klinik immünoterapi uygulamaları için onay almıştır. CAR vektör tasarımları, ilk keşiflerinden bu yana çarpıcı biçimde gelişmektedir. Birinci nesil CAR'ları (CD3ζ tabanlı), CD28 veya CD137 gibi ek sinyal bölgelerinden birini içeren ikinci nesil CAR'lar ve CD3ζ'nın yanında iki sinyal bölgesi daha içeren üçüncü nesil CAR'lar takip etmiş, ayrıca bunların yanına sitokin stimülasyonu için bir genin eklenmesiyle elde edilen dördüncü nesil CAR vektörleri de geliştirilmektedir. Doğal Öldürücü (NK) hücreler, kendi doğal reseptörleri tarafından tümör hücrelerini tanıyabilmektedir ve bu sebeple adoptif immünoterapi için umut vadeden yeni adaylar olarak öne çıkmaktadır. CAR ifade eden NK hücreleri de klinik olarak test edilmekte ve klinik uygulamaya çevrilme potansiyelini taşımaktadır fakat CAR vektör tasarımlarına dair literatürün büyük çoğunluğunu T hücreleri üzerinden yapılan gözlemler oluşturmaktadır. Bu tezde NK hücrelerinin tümör antijenlerine yönlendirilmesi için kullanılabilecek bir CAR vektörü tasarımının optimizasyonu için NK-92 hücrelerinin kullanılması amaçlanmıştır. CD19 antijenine karşı aynı antijen bağlanma bölgesine sahip fakat farklı hücre içi sinyal bölgelerinin (CD3ζ, CD28 ve CD137) kullanıldığı CAR genleri lentiviral vektörler aracılığıyla NK-92 hücrelerine aktarılmıştır. CD19+ hücre hatları Namalwa ve Daudi'nin yanı sıra CD19- hücre hattı K562 kullanılarak CAR-NK-92 hücrelerinin degranülasyon ve sitokin salımı aktiviteleri ile antijen özgüllükleri değerlendirilmiştir. Sonuçlar NK hücrelerine özel CAR vektörü tasarımları için önemli veriler sağlamaktadır.