Revealing the role of MED 14 in Pol II transcription regulation

Protein kodlayan genlerin RNA polimeraz II (Pol II) aracığıyla transkripsiyonu, koaktivatörleri de kapsayan bir çok faktörün katılımını gerektiren, çok aşamalı bir süreçtir.30 alt-birimlik , 2mDa insan Mediator kompleksi, Pol II aktivitesini transkripsiyonun tüm aşamalarında kontrol edebilen ve gene-özgü aktivatörlerle transkripsiyon başlama öncesi kompleks arasında bir köprü görevi gören, en önemli koaktivatördür. Bu çalışma, insan Mediator kompleksinin bir alt birimi olan MED14 proteininin Pol II ile direkt olarak etkileştiğini ve MED14'ün transkripsiyondaki rolunu açığa çıkarmıştır. Multibac Baculovirus Ekspresyon sistemi ve in vitro protein sentezine dayalı insan Mediator compleksi çalışmasıyla, Med14 'ün amino ucunun Pol II ile etkileştği gösterilmiş ve Pol II 'nun bu şekilde promotör DNA 'ya gelebildiği kanıtlanmıştır. İlk olarak bu çalışmayla Mediator 'ın Pol II ile nasıl etkileştiği and Pol II 'nun uygun bir transkripsiyon başlama öncesi kompleksi ile birlikte promotör DNA ya nasıl getirildiği çözülmüştür. Bu şekilde, Mediator kompleksinin universal olarak transkripsiyonu nasıl düzenlediğini aydınlatmış olmakla kalmayıp ilerki çalışmalarda tüm Mediator kompleksini in vitro sentezleyerek aktivatör- Mediator- Pol II etkileşim mekanizmasını çözmeyi hedeflemekteyiz.