Preparation of ionic activation of cryogel monolith columns for purification of poly-L-lysine

Kriyojeller sıfırın altındaki sıcaklıklarda üretilen büyük gözenekli, yüksek su tutma kapasiteli polimerik yapılardır. Bu polimerler biyoproses dahil bir çok alanda kullanılmaktadır. Bu tezin amacı, Ɛ-poli-L-lisin moleküllerinin ayırma ve saflaştırılması için öncelikle kriyojel monolit kolonları üretmek ve kullanmaktır. Bu sebeple akrilamid, hidroksietil akrilat ve hidroksietil metakrilat ile farklı sıcaklık ve monomer miktarları ve katalizörler kullanılarak kriyojel kolonları hazırlanmıştır. Sonrasında katyonik ve anyonik yüklemelerle aktifleştirilip, karakterizasyonları yapılmıştır. Bu karakterizasyonlarda, taramalı elektron mikroskopu görüntülenmesi yapılmıştır, şişme kapasitesi ve porozite, iyon değişim yükü, çapraz bağ derecesi hesaplanmıştır ve kimyasal yapı karakterizasyonu yapılmıştır. Bağlanma kapasitelerinin anlaşılması için, durağan bağlanma ve dinamik bağlanma deneyleri yapılmıştır. Anyonik yükleme için sodyum kloroasetat, katyonik yükleme için iyodometan kullanılmıştır. Yapılan çalışmalarda seçilen kolonlardan, anyonik yüklü akrilamit kolonların, Ɛ-PL bağlanma kapasitesi 0,009 g/mg ile 1,691 g/mg arasında bulunmuştur. Katyonik yüklü hidroksietil metakrilat kolonlarının, bovin serum albumin için bağlanma kapasiteleri 0,214 g/mg ile 1,132 g/mg bulunmuştur. Kolonların bağlanma kapasiteleri düşük olsa da yüksek akış hızlarında kullanılabilmektedirler. Fakat üretilen kolonların sürekli kromatografi için uygun olmadığı ve tek kullanımlık oldukları yapılan deneyler sonucunda anlaşılmıştır. Sonuç olarak kriyojel kolonlarının biyoproseslerde kullanımıyla ilgili daha fazla çalışma yapılması gerekmektedir.