Ayrıcalıklı bir avcı: NLRP7'nin immün ayrıcalıktaki rolü

NOD-Benzeri-Alıcılar (NLR) üyeleri apoptoz ve enflamasyonu regüle eden sitoplazmik alıcılar ailesidir. NLRP7, PYRIN bölgesi içeren bir NLR üyesidir ve fonksiyonları henüz bilinmemektedir. NLRP7'nin testiküler seminomada onkogenik bir rol üstlendiği ve bazı kanser türlerinde fazlaca ifade edildiği yayınlanmış birkaç ma-kalede gösterilmiştir. İlginçtir ki, NLRP7 beyin, testis ve plasenta gibi immün ayrıcalıklı dokular ile bazı başka dokularda ifade edilmektedir. Bunun yanında, NLRP7 mutasyon-larının kadınlarda ölü doğum ve düşüklerle sonuçlanan tekrarlayan hidatidiform mollere sebep olduğu bir çok farklı çalışmada gösterilmiştir. Ayrıca, NLRP7'nin IL-1ß seviye-lerini azalttığı ise bir makalede gösterilmiştir. Bu sebeple grubumuzca NLRP7'nin im-mün-baskılayıcı bir rolü olabileceği düşünülmüştür. Bu projenin amacı, NLRP7'nin im-mün ayrıcalıktaki ve enflamasyondaki olası rollerini belirlemektir. İlk olarak NLRP7 cDNA'sı konfokal hücresel lokalizasyon analizi ve immune-çöktürmeyle partner analizi için birçok vektöre klonlanmıştır (FLAG-, HA-, MYC-NLRP7 ve RFP-NLRP7, EGFP-NLRP7). Böylece NLRP7'nin HEK293FT hücrelerinde aşırı ifade edildiği koşullarda immün-çöktürme yöntemiyle etkileşim partnerleri ve lüsiferaz testiyle NF-?B yolağına olan etkileri belirlenmiştir. Bunlara ek olarak NLRP7'nin immün ayrıcalıktaki rolünü araştırmak için ölüm alıcıları ve HLA molekülleri ifadeleri, NLRP7'nin seviyelerinin stabil olarak düşürüldüğü HEC-1-A hücre hatlarında, gerçek zamanlı-PZR ve akış sitometrisi ile ölçülmüştür. RFP veya EGFP-NLRP7'nin hücresel lokalizasyonunun kon-fokal analizi sonucuna NLRP7'nin mitokondri ile minör ko-lokalizasyonu gözlemlenirken Kaspaz-1 ve/veya ASC'la çok net bir ko-lokalizasyon görülmüştür. Sonuçta, grubumuzca NLRP7'nin ASC ve Kaspaz-1'e bağlanarak bir inflamazom oluşturduğu ve IL-1ß'yı olgunlaştırdığı ve ayrıca IL-1ß'nın ekspresyonunu da regüle ettiği bulunmuştur. Ayrıca NLRP7 ifadesinin düşürülmesi sonucu TRAIL-R3, TNF-R2 ve TWEAK ve de ayrıca HLA A, B, C seviyeleri düşerken, Fas ifadesi artmıştır.