Bazı ligninolitik ve hidrolitik enzimlerin katı hal fermentasyonuyla üretimi

Bu tez kapsamında, Pleurotus eryngii'nin ligninolitik ve hidrolitik enzimlerinden lakkaz, mangan peroksidaz, lignin peroksidaz, karboksimetil sellülaz, ksilanaz, ekzoglukanaz, β-glukozidazın üretimleri şeftali ve vişne atıkları kullanılarak katı hal fermentasyonu koşullarında optimize edilmiştir. İlk olarak, meyve suyu endüstrisinden elde edilen bu atıkların sellüloz, lignin, indirgen şeker, total karbohidrat ve protein, azot ve bazı metaller açısından kimyasal bileşimleri belirlenmiştir. Kimyasal analizlere göre, bu atıklar lignosellülozik olarak adlandırılabilmektedir. P. eryngii hem şeftali hem de vişne atıkları üzerinde otuz gün boyunca katı hal fermentasyonu ile ön muamelenin olduğu ve-veya olmadığı koşullarda inkübe edilmiştir. Lignosellülozik substratlar inkubasyon öncesinde seyreltik asit ve baz çözeltileri, sıcak su ile ön muamele edilmiştir. Uygulanan ön işlem yöntemleri genellikle bu enzimlerin üretimlerini olumsuz etkilemiştir. Ayrıca, ligninolitik ve hidrolitik enzimlerin üretimleri üzerine farklı bileşiklerin; bakır, demir, Tween 80, amonyum nitrat ve manganın ve bunların değişen derişimlerinin etkileri detaylı olarak araştırılmıştır. Tezin ikinci kısmında, biyoteknolojik ve endüstriyel önemleri sebebiyle lakkazların saflaştırılmaları sırasıyla amonyum sülfat çöktürmesi, anyon değişim ve jel filtrasyon kromatografileri ile gerçekleştirilmiştir. Yüksek verim ve yüksek saflaştırma faktörü olan lakkaz fraksiyonları elektroforetik analizlere tabi tutulmuştur. Ayrıca, saflatırılan lakkazlar kısmi olarak karakterize edilmiştir. Saflaştırılan lakkaz aktiviteleri üzerine etilendiamin tetraasetik asit, fenilmetan sülfonil florid, iyodoasetamid, βmerkaptoetanol gibi seçilen kimyasal ajanların etkileri de incelenmiştir. Tezin üçüncü kısmında, üretim optimizasyonları, saflaştırma ve karakterizasyon çalışmalarına ek olarak bazı azo boyaların dekolorizasyonları her iki kültürden elde edilen ham ekstrakt ve saflaştırılan lakkazlarla gerçekleştirilmiştir ve lakkaz enzimlerinin stabiliteleri üzerine boyaların etkisi de araştırılmıştır. Son olarak, Fourier Dönüşümlü Infrared Spektrofotometre analizleri metil oranj boyasında değişimlerin olup olmadığını belirlemek için yapılmıştır.