Glutatyon S-transferaz enziminin Van Gölü inci kefali balığı (Chalcalburnus tarichi ) solungacından saflaştırılması, karakterizasyonu, bazı metal ve pestisitlerin enzim aktivitesi üzerine etkilerinin incelenmesi

Bu çalışmada, Van Gölü İnci Kefali Balığı solungacından glutatyon S-transferaz (E.C 1.8.1.7.; GST) enzimi glutatyon-agaroz afinite kromatografisi kullanılarak 11344.83 EÜ/mg protein aktiviteyle ve % 82,25 verimle 1543.51 kat saflaştırıldı. Saflaştırılan enzimin saflığını kontrol etmek amacıyla SDS-poliakrilamid jel elektroforezi yapıldı ve tek bant elde edildi. Molekül kütlesi yaklaşık 32,218 kDa olarak belirlendi. Enzim için K-fosfat tamponunda optimum pH 7,3, optimum iyonik şiddet 120 mM K-fosfat, optimum sıcaklık 35ºC olarak stabil pH ise K-fosfat tamponunda pH 8,0 olarak bulundu. Ayrıca CDNB için KM sabiti 1,0574 mM ve Vmax değeri 0,373 EÜ/ml olarak; GSH için ise, KM sabiti 0,1590 mM ve Vmax değeri 0,0854 EÜ/ml olarak tespit edildi. Van Gölü İnci Kefali Balığı solungacı GST enzimi üzerine bazı metal iyonları ile pestisitlerin etkileri incelendi ve inhibisyon etkisi gösteren B+3, Ba+2 , Al+3 ve Se-2 iyonları ile Oxamyl, Diniconazole, Carbofuran, Tebuconazole ve Atrazine pestisitleri için IC50 değerleri ve Ki sabitleri hesaplandı.