Doku transglutamınaz güdümlü integrin trafiğinin böbrek kanseri metastazı üzerine etkisi

Kanser hücrelerinin kontrolsüz migrasyonu sırasında hücre adhezyonu ve hücre iskeleti dinamikleri integrinler tarafından kontrol edilmektedir. Doku transglutaminazı (dTG), transglutaminazlar arasında dokularda en yaygın ifade edilen protein olmakla beraber dTG, Ca+2 varlığında proteinler arasında ε-(γ-glutamil)-lisin izopeptidi oluşturarak proteinler arası çapraz bağ kurduğu bilinmektedir. Son yapılan çalışmalar göstermiştir ki ileri renal hücreli böbrek kanseri (RHBK) tümörlerinde dTG seviyesi, ITGβ1 ve SDC4 proteinleri ile beraber artmakta bu nedenle kemoterapiye dirençli olan RHBK için yeni bir teröpatik markör olarak öne sürülmektedir. RHBK tedavisinde integrine spesifik tedavi ajanlarının yetkin etki göstermemesi dTG'nin sindekan-4 (SDC4) ile birlikte β1 integrinlerin hücre içine alımı ve dışarı çıkarılması mekanizmasında rol oynadığını öne sürmüş ve bu tezin hipotezini oluşturmuştur. Bu sebeple RHBK hücre hatlarında dTG ve ITGβ1&SDC4 arasındaki interaksiyon immün çökertme metodu ile belirlenmiş olup dTG ifadesi azaltılmış RHBK hücrelerinin β1 integrin matrislerine yapışma ve yayılma potansiyelleri incelenmiştir. dTG ve SDC4'ün ITGβ1'lerin hücre içine alınması belirlemek için hücre yüzeyindeki ITGβ1'ler biyotinlenerek immün çökerme uygulanmış; ITGβ1'lerin dışarı verilmesindeki rolünün belirlenmesi için ise ITGβ1'e özgü antikor ile etiketlenen integrinlerin hücre yüzeyi seviyesi akış sitometresi ile yapılmıştır. dTG seviyesi azalmış RHBK hücrelerinin integrin β1 matrislerine yapışması ve yayılmasında önemli ölçüde azalma bulunarak dTG' nin hücre adhezyonundaki görevi tespit edilmiştir. İncelenen dört farklı RHBK hücre hattından dTG ile ITGβ1 ve SDC-4 etkileşiminin Caki-1 metastatik hücre hattında en yüksek düzeyde olduğu bulunmuştur; bu nedenle shRNA teknolojisi ile dTG ve SDC4 proteinleri baskılanarak β1 integrinlerinin hücre içine alınması ve dışarı çıkması döngüsündeki rolü Caki-1 hücre hattında tespit edilmiştir. Sonuçlarımız ışığında dTG' nin SDC4 ile ITGβ1'nin hücre yüzeyindeki deviniminde rol oynadığı tespit edilerek RHBK metastazı nedeni olan hücre göçünde önemli rol oynayabileceği ortaya atılmıştır