Sorting nexin 3 (SNX3) is an immediate and sustained target of EFG stimulation in EGFR positive breast cells

Sorting nexin 3 (SNX3), endositik trafik ağında yer alan Sorting Nexin ailesinin bir üyesidir. SNX3 yalnızca endozomların fosfatidil inositol-3-fosfata bağlanmasına yardımcı olan ve erken endozomlarda retromer kompleksinin oluşumunda rol oynayan bir PX alanına sahiptir. Endositozla hücre içine alınan reseptörler, plazma zarına ve Trans-Golgi Ağı'na geri dönüştürülür veya lizozomlarda yıkıma uğrar. Epidermal Büyüme Faktörü Reseptörü'nün (EGFR) geri dönüştürülmesinde SNX3'ün rol oynadığı, bir epidermoid karsinom hücre hattında (A431) gösterilmiştir. Bu nedenle, SNX3'ün meme kanserlerinde EGF/EGFR ekseninin önemli bir bileşeni olduğunu varsaydık ve EGF uyarısına yanıt olarak EGFR pozitif hücrelerde SNX3 geninin nasıl düzenlendiğini araştırdık. Bu hipotezi test etmek için, EGF'ye yanıt veren bir hücre hattı olan EGFR (+) MCF10A hücrelerini kullandık. SNX3 stimülasyonunu zamana bağlı bir şekilde test ettik, EGF muamelesi yapılan hücrelerden RNA ve lizatlar topladık. EGF uyarımı üzerine SNX3 proteininin erken ve sürekli cevap olarak arttığını gözlemledik. İlginç bir şekilde, erken zaman aralığında SNX3 protein miktarındaki artış, transkripsiyonel düzenlemeden bağımsızdı. EGF stimülasyonu protein yarı ömrünü uzattı. Bununla birlikte, EGF stimülasyonuna geç yanıt, RT-qPCR ile gösterildiği gibi transkripsiyonel artıştan kaynaklanmıştır. Ayrıca, SNX3 protein artışının, EGFR inhibitörü AG1478 ve EGFR alt yolaklarını bloke eden diğer inhibitörleri kullanarak EGFR yolağına özgü olduğunu da gösterdik. Bu gözlemler, EGFR (+) başka bir hücre hattı olan HEK293 hücrelerinde de doğrulandı. Genel olarak, bu sonuçlar SNX3'ü EGF/EGFR ekseninin önemli bir bileşeni olarak EGF stimülasyonunun erken ve sürekli hedefi olarak göstermektedir. Bu bulgular için çıkarımlar, EGFR biyolojisinin daha iyi anlaşılmasında önemli olacaktır.