Polı̇amfolı̇t sentezı̇ ve enzı̇mlerle faz ayrışması

Kompleks koaservasyon, süpernatant olarak adlandırılan bir seyreltik faz ve koaservat olarak adlandırılan bir yoğun faz olmak üzere iki ayrı faz içeren bir sıvı-sıvı faz ayrımı olarak tanımlanır. Koaservasyon, enzimler gibi aktif maddelerin pH, tuz konsantrasyonları ve sıcaklık gibi çevresel faktörlerden korunmasını sağlayan bir enkapsülasyon yöntemi olarak kullanılabilir. Bu yöntemde çoğunlukla zıt yüklü polielektrolitler kullanılsa da, hem pozitif hem de negatif yüklü polielektrolitler olan poliamfolitleri içeren koaservasyon çalışmaları, omurgalarında zıt yükler taşıyan içsel olarak düzensiz proteinleri taklit etmeleri açısından önemlidir. Bu çalışmanın amacı, karbodiimid kimyası yoluyla 1,4-Diaminobutan dihidroklorür (DN), adipik dihidrazid (ADH) ve etilendiamin dihidroklorür (EDA) kullanarak farklı aşılama oranlarına sahip hiyalüronik asit bazlı poliamfolitler (PA) sentezlemektir. Bu poliamfolitleri karakterize etmek için 1H-Nükleer Manyetik Rezonans (1H-NMR) ve Fourier Dönüşümü Kızılötesi (FTIR) spektroskopisi modifiye HA'nın kimyasal yapısını incelemek için kullanılmıştır. Poliamfolitlerin izoelektrik noktalarını (pI) elde etmek için zeta potansiyeli deneyleri yapılmıştır. Sentezlenen poliamfolitler, alfakimotripsin (αCT) (pI = 8.76), karbonik anhidraz (CA) (pI = 5.9) ve lizozim (LYS) (pI = 11) gibi farklı izoelektrik noktalarına (pI) sahip enzimleri kapsüllemek için kullanılmıştır. Seçilen enzimlerin optimum pH'ında faz ayrışmasının gerçekleştiği aralığı belirlemek için pH ve NaCl konsantrasyonu değiştirilerek türbidimetrik titrasyon deneyleri yapılmıştır.