Termofilik Geobacillus sp. TF16 suşundan saflaştırılan fitazın farklı destek materyallerine immobilizasyonu, immobilize enzimlerin karakterizasyonu ve doğal bir besin kaynağındaki fitatı parçalama etkinliğinin incelenmesi

Bu çalışmada yeni tanımlanmış termofilik bir bakteri suşu olan Geobacillus sp. TF16'dan saflaştırılan endüstriyel öneme sahip fitaz enzimi Kitosana ve Ca-Alginata immobilize edildi. Kitosana immobilize enzimin sodyum fitat substratı varlığında optimum pH ve sıcaklık değerleri sırası ile 5,0 ve 95°C, Ca-Alginata immobilize enzimin ise sodyum fitat substratı varlığında optimum pH ve sıcaklık değerleri sırası ile 3,0 ve 75°C olarak tespit edildi. Kitosana immobilize enzimin 4, 35 ve 95oC'de 24 saat sonunda aktivitesini yaklaşık olarak %85'nin üzerinde, Ca-Alginata immobilize enzimin ise 4, 35 ve 75oC'de 24 saat sonunda aktivitesini yaklaşık olarak %80'nin üzerinde koruduğu tespit edildi. İmmobilize enzimlerin ısıl kararlılığı incelendiğinde, 4oC'de 24 saat sonunda ve 35oC ve 75-95oC'de 4 saat sonunda enzim aktivitelerinin büyük oranda korunduğu tespit edildi. Sodyum fitat substratı için enzimin kinetik parametreleri olan Vmax ve Km değerleri sırasıyla Kitosanda 3401,36 U/mg ve 2,38 mM, Ca-Alginatta ise 5011,12 U/mg ve 7,5 mM olarak hesaplandı. İmmobilize enzimlerin metal iyonları varlığında aktivitelerini büyük oranda koruduğu, EDTA mevcudiyetinde ise kısmen kaybettiği tespit edildi. Proteazlar varlığında Kitosana immobilize fitazın aktivitesini %76 oranında, Ca-Alginata immobilize fitazın ise aktivitesini %60 oranında koruduğu saptandı. İmmobilize enzimler soya sütü ile muamele edilerek fitat parçalama etkinlikleri de incelenmiş ve bu değerler Kitosana immobilize enzim için %24 ve Ca-Alginata immobilize enzim için %33 olarak bulunmuştur.