SH-SY5Y hücrelerine dayalı nörodejeneratif hastalıkları incelemek için için vitro modeller

Sunulan çalışmanın temel amacı, farklılaşmış SHSY5Y nöroblastoma hücrelerinde elektrofizyolojik kayıtlar, floresan mikroskobu ve in-siliko araçlar gibi çeşitli biyofiziksel analizler yaparak in-vitro bir model tasarlamaktir. Modeli doğrulamak için, Beyinden Türetilmiş Nörotropik Faktörün (BDNF) amiloid beta peptitlerden kaynaklanan nörodejenerasyon sırasında transmembran akımlarının üzerindeki etkilerini araştırmak için bir demonstrasyon çalışması yapılmıştır. Retinoik Asit (RA) ile farklılaşan kontrol grubuna BDNF'in de farklılaşma ajanı olarak eklendiği iki protokol geliştirilmiştir. Faktin ve DAPI çekirdek boyaması dahil olmak üzere morfolojik ve floresan analizleri, hücre farklılaşmasını ve hücreler tarafından amiloid beta peptitlerinin alınmasını doğrulamak ve karakterize etmek için kullanılmıştır.Sonuçlar, BDNF'in amiloid beta'ya karşı hücre canlılığını önemli ölçüde arttırdığını, ancak transmembran akımlarının sağ kalan hücrelerde büyük ölçüde değiştiğini göstermekte ve Alzheimer hastalığında hayatta kalan hücrelerde fonksiyonel değişiklikler olduğuna işaret etmektedir. Ayrıca tasarlanan model söz konusu hücrelerden yeni bir elektrofizyolojik kayıt tekniğinin geliştirilmesi için kullanılmıştır. Bu tezde sunulan lipit kaplı kayıt, cam mikro pipetler ile hücrelere dokunmadan önce gigaseal elde etmek için 1-palmitoil-2-oleoil-sn-glisero-3-fosfokolin (POPC) gibi bir sentetik çift katmanlı lipit tabakası kullanılmıştır. Bu çalışmadaki sunulan sonuçlar, teknolojinin daha fazla geliştirilmesi ve uygulamalarında artış için bir ilk optimizasyon aşamasını ve konsept kanıtını temsil etmektedir.