BT474 ve MDA-MB-231 meme kanseri hücre hattında ruxolitinib ve MK-2206'nın östrojen sinyal yolağının PI3K/AKT ve JAK/STAT sinyal yolakları üzerindeki ilişkinin araştırılması

Tümörlü bir hücrede, pro-apoptotik ve anti-apoptotik proteinlerin dengesinin bozulması gerçekleşir. PI3K/AKT,JAK/STAT ve MAPK sinyali kanser hücresinin çoğalmasında, anjiyogenez ve metastazın düzenlenmesinde önemli bir rol oynar. Bu sinyal yolaklarını hedefleyen inhibitörlerle hücre proliferasyonunun azaltılması ve hücre ölümünün uyarılması terapötik yaklaşımlardandır. Ruxolitinib,JAK1/2'yi hedef alan RTK inhibitörüdür. MK-2206 seçici bir AKT inhibitörüdür. Ruxolitinib'in kanser hücrelerinde daha etkili bir şekilde etki edebilmesi, tümör hücrelerindeki ilaç birikiminin seçici bir şekilde arttırılması, ilaçların toksik ve yan etkilerinin azaltması gereksinimi bulunmaktadır. Bu çalışmada ilk olarak BT474(ER+, PR+, HER2+) ve MDA-MB-231(ER-, PR-, HER2-) meme kanseri hücrelerinde birbiri ile sinerjistik etki gösteren Ruxolitinib ve MK-2206'nın kombine tedavisi bu eksikliğin giderilmesi hedeflenmiştir. İkinci olarak Ruxolitinib ve MK-2206 yüklü PCL nanopartiküller sentezlenerek bu eksikliğin giderilebilmesi hedeflenmiştir. İlaçların serbest ve nano formlarının IC50 değerleri MTT; anti-proliferatif etkileri Survival,Soft Agar,Koloni Oluşum,Yara iyileşme testleriyle; hücrelerdeki morfolojik değişiklikler Hoechst33342 ile incelenmiştir. İlaçların hücrelerde apoptoz,ERα,MAPK,PI3K/AKT ve JAK/STAT yolakları üzerindeki etkileri immunblotlamayla incelenmiştir. Ruxolitinib+MK-2206 uygulamasının BT474 hücrelerinde PI3K/AKT,MAPK ve JAK/STAT3 yolağını inhibe ederek ekstrinsik yolağı,MDA-MB-231 hücrelerinde PI3K/AKT,MAPK ve JAK/STAT5 yolağını inhibe ederek intrinsik yolağı aktive ettiği gözlemlenmiştir. PCL-NP'lerin her iki hücrede toksik etkisi olmadığı gözlemlenmiştir. Ruxolitinib'inn IC50 değerinin nanoformuyla birlikte BT474 hücrelerinde 50 kat azaldığı gözlenmiştir. Hücrelerde Rux-PCL-NP ve MK-PCL-NP'nin PI3K/AKT, MAPK, JAK/STAT yolağı üzerinde benzer etkileri olduğu gözlenmiştir.