Roles of cell surface proteins during cytokinesis

Hücre bölünmesi; kromozomların, hücre bölünmesiyle ilişkilendirilmiş çeşitli proteinlerin, hücre iskeletinin ve hücre zarının koordineli çalışmaları ile gerçekleşen bir süreçtir. Bu olgular pek çok hücre biyolojisi laboratuvarında etraflıca araştırılmaktadır. Ancak hücre yüzeyi bileşenlerinin ve hücre içi bölünme mekanizmasının özellikle sitokinezde birbiriyle nasıl iletişim kurduklarını inceleyen çalışmaların sayısı oldukça azdır. Bu projede, hücre yüzeyi proteinlerinin hücre bölünmesindeki rollerini araştırmayı amaçladık. Eggert Laboratuvarında daha önceden yapılmış çalışmalar, Glypican 3 ve 5 proteinlerinin sitokinezde rol alıyor olabileceklerini ortaya çıkarmıştı. Glypicanlar ökaryotlar arasında evrimsel olarak hayli korunmuş olan heparan sülfat proteoglikanlarındandır. Glypicanlar sadece bir GPI modifikasyonuyla plazma membranına kovalent olarak bağlanmış olup, kendileri tamamen hücre dışı matrise bakacak şekilde konumlanmışlardır. Bu tezde, Glypican 3 ve 5 in hücre bölünmesi sırasındaki lokalizasyonlarını belirledim ve bölünme fenotiplerini karakterize ettim. Glypican 3 ve 5 proteinlerinin interfazdaki ve sitokinezdeki etkileşim partnerlerini, yakınlık bazlı kütle spektrometrisi analiziyle ortaya çıkarttık. Çalışmamız, Glypican 5 proteininin kortikal aktin stabilitesi ve iğ kalıntısı kesilmeside (midbody abscission) önemli rolleri olabileceğini ortaya çıkarmıştır. Bunun yanında, Glypican 3 ve 5 proteinlerinin etkileşim partnerlerinin analizi, bu proteinlerin sitokinezdeki rollerinin anlaşılması açısından önemli ipuçları vermektedir.