Broyler civcivlerin dalağında TLR4 ve MHC II moleküllerinin dağılımının araştırılması

Sunulan çalışmada, broyler civcivlerin yaşamlarının ilk iki haftası içinde, dalak dokusunun gelişimi ile beraber, TLR4 ve MHC II moleküllerinin dağılımının, kontrol ve antijen ile uyarılmış gruplarda araştırılması amaçlandı. Materyal olarak 225 adet Ross 308 ticari etlik civciv kullanıldı. Civcivler 1, 4, 7, 10, 14 günlük olmak üzere her biri 45'er adet civciv içeren 5 ana gruba ayrıldı. Her grup kendi içinde kontrol, PBS ve LPS uygulanan gruplar olmak üzere üç alt gruba ayrıldı. Antijenik uyarım 1mg/kg LPS'nin intra-abdominal uygulaması ile gerçekleştirildi. Uygulamadan 1, 3, 6, 12 ve 24 saat sonra PBS ve LPS uygulanan üçer hayvandan doku örneği alındı. Aynı saatlerde, kontrol grubundan da üçer hayvandan doku örneği alındı. Histolojik inceleme için örnekler üçlü boyama, Gordon ve Sweet'in gümüşleme metodu ve orsein-giemsa boyama yöntemleriyle boyandı. İmmunohistokimyasal olarak TLR4 ve MHC II'nin ekspresyonlarını belirlemek için, strept-ABC yöntemi uygulandı. Bir ve 14 gün arasında dalağın histolojik gelişimi kaydedildi. Başlangıçtan dört günlük olana kadar yoğun granülopoezis görüldü. Bir günlükten itibaren dalakta TLR4 pozitivitesinin bulunduğu, yaygın granüler tarzda olduğu ve genellikle kırmızı pulpada olan bazı hücrelerde yoğun olarak bulunduğu dikkati çekti. Dört günlük örneklerde PEL'de, yedi günden itibaren GC'de belirgin TLR4 pozitivitesi gösteren hücreler gözlendi. İstatistiksel değerlendirme sonucunda, farklı günlerde difuz granüler TLR4 pozitivitesinde dalgalanmalar olduğu tespit edildi. Yoğun TLR4 pozitivitesi içeren hücrelerin ise 14 günlük örneklerde antijen uyarımı ile arttığı belirlendi. TLR4 yoğunluğunun nonspesifik savunma hücrelerinin yanında, endotel ve düz kas hücrelerinde de olduğu gözlendi. MHC II pozitivitesinin bir günlükten itibaren SCL, PAL, PEL, PVL, GC'de ve kırmızı pulpada bulunduğu görüldü. Kontrol grubunda bir günlük örneklerde diğer gruplardan daha az olduğu dikkati çekti. LPS uyarımı ile bir ve 14 günlük örneklerde yoğunluğunun arttığı belirlendi. Dalakta bir günlükten itibaren nonspesifik savunma mekanizmasının var olduğu ve on dört günlük örneklerde dalağın histolojik ve fonksiyonel anlamda gelişmiş olduğu gözlendi. Bundan sonraki çalışmalarda dalakta TLR4 ve MHC II pozitivitesinin hücre bazında çalışılmasının uygun olacağı düşünüldü.