Radyoaktif İyod-131 ile işaretli bleomycin-glukuronid'in hücre düzeyinde terapötik etkinliğinin incelenmesi

Antikanser ajanı olarak kullanılan Bleomycin (BLM) ilk olarak 1966 yılında, Japonbilim adamı Umezawa ve arkadaşları tarafından Streptomyces verticillus'ün birmayalanma ürünü olarak izole edilmiş önemli glikopeptid yapılı bir antibiyotiktir.BLM'in iki türü vardır. Bunlar BLM A2 ve BLM B2'dir. Her ikisinin sitotoksik etkileriDNA fragmentasyonuna neden olma yeteneklerinden kaynaklanır. Etki spektrumuoldukça geniştir. BLM başlıca lenfosit kanseri olmak üzere yassı epitel karsinomları,testis kanseri ve taban siğilleri gibi birçok hastalık çeşidinde tedavi potansiyelinesahiptir.Yaptığımız bu çalışmanın amacı enzimatik olarak sentezlenen Bleomycinglukuronid'i(BLMG) 131I ile işaretlemek ve işaretli bileşiklerin terapötik etkinliğinininsandan elde edilen PC-3 (prostat), Caco (kalın barsak), Hutu (ince barsak) veA549 (akciğer) kanser hücre hatları üzerindeki inkorporasyonları in vitro olarakincelemek ve radyoişaretli bileşiklerin kanser hücreleri üzerindeki bağlanmaverimlerini hesaplamaktır. Bunun için ilk olarak UDP-glukuronil transferaz enzimininyoğun şekilde lokalize olduğu sıçan karaciğerinden izole edilen UDP-glukuroniltransferaz enzimi (UDPGT) ile BLMG enzimatik yolla sentezlenmiş daha sonra,HPLC yöntemi ile BLMG'nin izolasyon çalışmaları yapılmıştır. Bir sonraki adımda 131Iile işaretli BLM (131I-BLM) ve BLMG'nin (131I-BLMG) kalite kontrol çalışmalarıradyokromatografik yöntem kullanılarak gerçekleştirilmiştir. Bu kapsamda yapılançalışmalardan 131I-BLM ve 131I-BLMG için bağlanma verimleri sırasıyla % 90 ve% 80 olarak bulunmuştur. Daha sonraki adımda hücre kültürü çalışmalarınageçilmiş, 131I, 131I-BLM ve 131I-BLMG'nin PC-3 (Prostat) kanser hücrelerinebağlanma verimleri incelenerek optimum zaman, madde miktarı ve spesifik aktiviteparametreleri belirlenmiştir. Belirlenen optimum şartlar kullanılarak 131I, 131I-BLM ve131I-BLMG'nin Caco (kalın barsak), Hutu (ince barsak) ve A549 (akciğer) kanserhücre hatları üzerindeki bağlanma verimleri incelenmiş, deneysel verilerin tamamıGraphPad istatistik programı kullanılarak değerlendirilmiş ve yorumlanmıştır. AyrıcaBLM ve BLMG'nin PC-3 kanser hücre hattı üzerindeki sitotoksiteleri incelenmiş veBLM ile BLMG FITC (fluorescein isothiocyanate) ile işaretlenerek PC-3 kanser hücrehattı üzerinde floresan görüntüleri alınmıştır.Sonuç olarak incelenen tüm hücre hatlarındaki işaretli bileşiklerin tutulumlarıkarşılaştırıldığında 131I-BLMG'nin hücrelerdeki tutulumunun 131I-BLM'nin tutulumunagöre yaklaşık 5-6 kat fazla olduğu tespit edilmiştir. Bu sonuç da, BLMG bileşiğininkonvansiyonel kemoterapötik ajan olarak kullanılan BLM'ye göre çok daha etkili biranti-tümör ajan olabilme potansiyeline sahip olduğunu göstermektedir.