Kan kültüründen izole edilen Pseudomonas aeruginosa suşlarında karbapenem direnç mekanizmalarının fenotipik ve moleküler yöntemlerle araştırılması

Amaç: Karbapenem dirençli Pseudomonas aeruginosa (KDPA) tüm dünyada önemli bir enfeksiyon etkeni olarak görülmektedir. Bu çalışmada kan kültüründe üreyen P. aeruginosa izolatlarında karbapenem direnci ile ilişkili mekanizmaların araştırılması amaçlanmıştır. Yöntem: Çalışmamıza kan örneklerinden üretilen KDPA izolatları dahil edildi. Karbapenem minimum inhibitor konsantrasyon değerleri sıvı mikrodilüsyon yöntemiyle belirlendi. Karbapenemaz üretiminin tespiti için karbapenem inaktivasyon metodu ve karbapenemaz genlerinin araştırılması için polimeraz zincir reaksiyonu kullanıldı. İndüklenebilir AmpC β-laktamaz tespiti için disk antagonizm testi yapıldı. Efluks pompasının aşırı üretimi, efluks pompa inhibitörü olan fenilalanin-arjinin β-naftilamid kullanılarak sıvı mikrodilüsyon yöntemiyle ve çeşitli efluks pompa genlerinin (mexB, mexD, mexF, mexY) gerçek zamanlı polimeraz zincir reaksiyonu (RT-PCR) yöntemiyle belirlendi. Porin proteini geni oprD'nin ekspresyon seviyeleri RT-PCR ile incelendi. Bulgular ve Sonuç: Kan örneklerinden izole edilen 48 KDPA izolatı çalışmaya dahil edildi. İzolatların tamamı imipeneme, %97,9'u doripeneme, %75'i meropeneme dirençli ve %50'sinin çok ilaca dirençli olduğu saptandı. İzolatların 7'sinde (%14,6) fenotipik olarak karbapenemaz varlığı tespit edildi ve blaVIM geni bulundu diğer karbapenemaz genleri ise tespit edilemedi. İzolatların 23'ünde (%47,9) indüklenebilir AmpC β-laktamaz varlığı saptandı. İzolatların 35'inde (%72,9) fenotipik olarak efluks pompasının aşırı ekspresyonu tespit edildi; 36'sında (%75) mexY, 5'inde (%10,5) mexB, 5'inde (%10,5) mexF ve 1'inde (%2) mexD efluks pompası geninin aşırı ekspresyonu saptandı. İzolatların hiçbirinde oprD geninin ekspresyon seviyesinin anlamlı azalması belirlenemedi.