7,12-dimetilbenz(a)antrasen (DMBA) ile indüklenen fare ovaryumunda hippo sinyal yolağının belirlenmesi

7,12-dimetilbenz(a)antrasen (DMBA), kemirgen ovaryumunda foliküler gelişim üzerinde iyi bilinen bir ovotoksik ve karsinojenik etkiye sahiptir. Hippo sinyal yolağı, çeşitli canlı türlerinde hücre proliferasyonunu, farklılaşmasını, apoptozunu ve organ boyutunun düzenlenmesini kontrol eder. DMBA uygulanmış fare ovaryumlarında foliküler gelişim ve Hippo sinyal yolağı arasındaki ilişki daha önceki çalışmalarda araştırılmamıştır. Bu nedenle, bu tez çalışmasında, Hippo sinyal yolağı proteinlerinin fare ovaryumunda DMBA uygulaması ile indüklenen ovotoksisitede bir rolü olabileceğini hipotez etmekteyiz. DMBA uygulanan ovaryumlarda Hippo sinyal yolağını immünohistokimya ve kantitatif gerçek zamanlı PCR (qRT-PCR) yöntemleri ile göstermeyi amaçlamaktayız. Bu tez çalışmasında 28 günlük 18 adet BalbC dişi fare kullanılarak 3 grup oluşturulmuştur (n=6): Kontrol grubu (Herhangi bir tedavinin yapılmadığı grup), Çözgen grubu (Sadece susam yağı verilen grup), Deney grubu (1 mg/kg DMBA'nın susam yağı içinde çözülerek 14 gün boyunca intraperitoneal olarak verildiği grup). DMBA ile kontrol fare ovaryumları arasındaki morfolojik farklılıkları göstermek için kesitler Periyodik Asit-Schiff (PAS) boyası ile boyandı. Ovaryumdaki folikül rezervini belirlemek amacıyla ELISA yöntemi ile AMH serum seviyeleri ve folikül sayımı yapıldı. Hippo sinyal yolağı proteinleri olan MST1/2, LATS1/2, YAP1 ve TEAD4 lokalizasyonlarını belirlemek ve ayrıca ovaryumda oksidatif stresi göstermek amacıyla NTY antikoru ile immünohistokimya yapıldı. Hippo sinyal proteinlerinin mRNA seviyeleri qRT-PCR yöntemi ile belirlendi. Sonuçlara göre, DMBA ile indüklenen fare ovotoksisite modelinde azalmış foliküler rezerv, artmış oksidatif stres ve foliküler atrezi gösterildi. Çalışmamızda ilk kez DMBA uygulanan fare ovaryumlarında foliküler gelişim ile Hippo sinyal yolağı arasındaki ilişki gösterilmiştir. Verilerimizin, foliküler rezervin hızla tükenmesine ve fare ovaryumlarında DMBA ile indüklenen ovotoksisite ile ilgili sinyal mekanizmasına yeni bir ışık tutacağına inanıyoruz. Dolayısıyla, bu çalışma sonucunda elde edilen verilerin ovotoksisite ile ilgili problemlerin daha fazla araştırılmasına ve yeni stratejilerin geliştirilmesine katkıda bulunabileceği ileri sürülmektedir.