Aktinomisetden izole edilen ekstrasellüler proteazın karakterizasyonu

Bu çalışmada Streptomyces sp. BSU-1 izolatından ekstrasellüler olarak üretilen proteaz enziminin karakterizasyonu yapılmıştır. Streptomyces sp. BSU-1 izolatı glukoz içeren besiyeride 30 C'de 3 gün süresince çoğaltılmıştır. Enzimin optimum reaksiyon sıcaklığı ve pH'sı sırasıyla 60 C ve pH 10 olarak bulunmuştur. Proteaz enziminin, 50 C'de 120 dakika boyunca aktivitesinin yaklaşık %80'ini ve pH 8-12 aralığında aktivitesini yüksek oranda koruduğu bulunmuştur. Enzim aktivitesi üzerine farklı metal iyonlarının etkisi incelenmiştir. Na+1, Ca+2, Zn+2 ve Mg+2'nin aktiviteyi koruduğu, Mn+2 ve Cu+2 iyonlarının aktiviteyi artırdığı görülürken, Hg+2 metal iyonunun ise inhibe etki gösterdiği görülmüştür. Diğer metallerin aktivitede bir miktar düşüse sebep olduğu gözlemlenmiştir. Enzim aktivitesi üzerine çözücülerin etkisi incelendiğinde aktivitenin yüksek oranda korunduğu gözlemlenmiştir. Artan Tween-80 ve Triton X-100 konsantrasyonu aktiviteyi artırırken, H2O2 aktivite kaybına neden olmuştur. Enzimin, zimogram analizi sonucu tek bant görülmüş ve molekül ağırlığı yaklaşık 48 kDa olarak tespit edilmiştir.