Bazı nörokimyasal maddelerin sıçan beyninden mikrodiyaliz ile toplanması ve analitik yöntemlerle miktar tayini

Bu çalismada siçan beyin mikrodiyalizatlarinda bazi nörokimyasal maddelerin tayini için elektrosprey iyonizasyonlu sivi kromatografi kütle spektrometri (ESILC- MS) yöntemi tanitilmaktadir. Iyon tuzagi kütle analizörü ile sekiz adet nörokimyasal (epinefrin, norepinefrin, dopamin, 3,4-dihidroksifenilasetik asit (DOPAC), histamin, g-aminobutirik asit, L-glutamat, asetilkolin) için kütle spektrumlari ve kütle parçalanmalari belirlendikten sonra sivi kromatografik ayirma kosullari incelenmistir. C18 kolon (2.1x100 mm, 3.5 ?m) ve % 0.1 asetik asit içeren su-asetonitril gradient hareketli faz sisteminde türevlendirici ajan olan 4-kloro-7-nitro-2,1,3-benzoksadiazol (NBD-Cl) ile türevlendirilerek ayrilan g- aminobutirik asit ve histamin için yöntemin validasyonu gösterilmistir. GABANBD için 267à249 m/z kütlesinden olusan parçalanma kütlesi, histamin için sadece 275 m/z ana kütlesi kullanilarak olusturulan kromatogramda miktar tayini yapilmistir. Dogrusal aralik g-aminobutirik asit için 10-500 ng.mL-1, histamin için 50-1000 ng.mL-1 bulunmustur. Yöntemin tayin sinirlari g-aminobutirik asit için 10 ng.mL-1, histamin için 50 ng.mL-1 olarak hesaplanmistir. Yöntemin GABA ve histamin için elde edilen dogrulugu % 98 dolayinda saglanan geri kazanim ile, tekrar edilebilirligi ise gün içi % 1.65-2.62, günler arasi % 1.23-4.93 bagil standart sapma degerleri ile gösterilmistir. Siçan beyninin ventral anterior nucleus, lateral hypothalamus ve corpus striatum bölgelerinden toplanan mikrodiyalizat örneklerinde g-aminobutirik asitin bazal düzeyleri ölçülerek sirasiyla 123.25±0.67, 151.41±18.53, 94.96±0.53 ng.mL-1 olarak bulunmustur. Anahtar Kelimeler: Nörokimyasallar, Histamin, g-Aminobutirik Asit, Türevlendirme, Mikrodiyaliz, LC-MS