Çağla badem (Prunus dulcis) bitkisinden polifenol oksidaz enziminin saflaştırılması ve karakterizasyonu

Polifenol oksidaz (PPO) enzimi badem çağladan (Prunus dulcis) ekstrakte edilmiş ve amonyum sülfatla çöktürme, diyaliz, jel filtrasyon kromotografisi yöntemleri ile saflaştırılmıştır. Amonyum sülfat çöktürme ve diyaliz işlemlerinden elde edilen örnek, PPO enziminin karakterizasyonu için kullanılmıştır. Bu amaçla, optimum pH ve sıcaklık değerleri farklı substrat kullanılarak belirlenmiştir. PPO enziminin en iyi substratın 4-metil katekol olduğu bulunmuştur. Bu subtrat için optimum pH ve sıcaklık değerleri sırasıyla 6,5 ve 35 oC olarak belirlenmiştir. Km ve Vmax değerleri 1,71 mM ve 99,0 ?A dak-1 olarak bulunmuştur. Bu çalışmada yedi adet inhibitör ile çalışılmış ve etkili olanların yarışmalı inhibitör olarak sodyum azid, benzoik asit, sitrik asit, L-askorbik asit ve tiyoüre olduğu bulunmuştur. Metallerin PPO enzim aktivitesi üzerine etkisi incelenmiş Fe+3, Cu+2, Mn+4, Pb+2 metallerinin enzim aktivitesini artırırken Zn+2, Mg+2, Ba+2, Ca+2, Co+3, Sn+2, K+1 metallerinin enzim aktivitesini azalttığı bulunmuştur.