Maya sentrozom boyutu bakımında Bud14 fonksiyonunun karakterizasyonu

Hücre döngüsü, DNA çoğalmasını ve kromozom ayrılmasını yöneten, kapsamlı bir şekilde korunmuş bir süreçtir. Ökaryotik hücreler, kromozomlarını sentrozom adı verilen mil kutupları arasında oluşan mitotik iğ aracılığıyla yavru hücrelere dağıtır. Mil Kutup Gövdesi (SPB), S. cerevisiae'deki memeli sentrozomunun işlevsel bir eşdeğeridir. SPB, farklı yapısal katmanlardan oluşur ve yaşam döngüsü boyunca nükleer bir zarfın içine gömülür, böylece sitoplazmik ve nükleer mikrotübülleri çekirdeklendirir. Maya sentrozomunun boyutu hücre döngüsü boyunca değişir. Ayrıca hücre döngüsü durdurma koşullarının SPB boyutu üzerinde çeşitli etkileri vardır. Son çalışmalar, SPB'nin büyüme ve değişim döngülerinden geçtiğini, dolayısıyla daha önce beklenmeyen bir ölçüde dinamik bir maya sentrozomunu tasvir ettiğini gösterdi. Bu çalışmada Bud14'ün SPB boyutunun korunmasında yeni bir rolünü belirledik. SPB yapısal proteinlerinin göreceli ve kesin miktarlarının mikroskopi bazlı miktarının belirlenmesi yoluyla, Bud14 içermeyen hücrelerin SPB'lerinde daha fazla Spc72, Nud1, Spc97, Spc42, Spc29 ve Spc110'a sahip olduğunu gösterdik. Bud14 aynı zamanda Protein Fosfataz 1 Glc7'nin düzenleyici bir alt birimidir. Spc29, Spc97, Spc110 ve Spc42 boyut kontrolünde Bud14 fonksiyonunun Glc7 ile etkileşimine bağlı olduğunu belirttik. Hücre döngüsü boyunca molekül sayılarını ölçerek Spc110 ve Spc72 dinamiklerini açıkladık. Bu dinamik doğa, mitotik iğ oluşumunun ayrılmaz bir parçası olabilir ve hücresel koşullardaki değişikliklere tepki vermek için bir mekanizma sunar. Ayrıca bu araştırma, Bud14 içermeyen hücrelerde Spc72 ve Spc110 boyutunun korunması için fonksiyonel Cdc14 fosfatazın gerekli olduğunu ortaya koydu. Cdc28'in SPB dış plakasına kuvvetli lokalizasyonu, SPB yapısal proteinlerinin fosforilasyonunun bunların SPB'de genişlemesine neden olduğunu ortaya çıkardı. Bu araştırma Bud14'ün SPB boyutunu öncelikle Glc7 ile etkileşimi yoluyla düzenlediğini belirledi. Cdc14 ayrıca SPB boyutu kontrol ağında çalışır (Sonuç 3.8 ve 3.9).