Optimization of biosimilar monoclonal antibody production in CHO cells and its characterization

Biyobenzer monoklonal antikor (mAb) geliştirilmesi, günümüz biyofarmasötik endüstrisinin odağı haline gelmiştir. Küresel market rekabeti göz önünde bulundurulduğunda, geliştirme sürecinin başında, kritik kalite özelliklerini ayarlamak için stratejilerin geliştirilmesi zaman, işgücü, ve maliyetler açısından büyük önem taşımaktadır. Özellikle teknolojik ve farmasötik olarak hızlı bir şekilde gelişmekte olan Türkiye, biyobenzer piyasasını genişletmekte olup, yeni buluşların ihtiyacını çekmektedir. Bu çalışma, Çin Hemstır Yumurtalık (CHO) hücrelerinde, C5mAb'ın bir biyobenzerinin geliştirilmesi için optimum koşulların araştırılmasına odaklanmaktadır. C5mAb, kompleman sistemde C5'i bloke ederek bazı nadir hastalılar için önemli bir hedef oluşturmaktadır. Bu çalışmaya özgü yenilikler, CHO ekspresyon sisteminin kullanılarak hibrit ve insanlaştırılmış bir mAb üretiminin geliştirilmesi, Design of Experiments (DoEs) metodolojisi kullanılarak proses parametrelerinin ve kültür besleme stratejilerinin taranarak belirlenmesi, ve biyobenzer bir C5mAb üretimi için proses parametrelerinin optimize edilmesi ile ortaya konmuştur. Çalışma, biyobenzerliğin ortaya konması amacıyla, glikan yapıları ve potansi olmak üzere kritik kalite parametrelerinin analizini ve biyoreaktör sistemlerinde ileri doğrulamaları içerir. E90-02 klonu ile, uzatmalı besleme stratejisi kullanılarak, dayanıklı bir 14 günlük kesikli-beslemeli kültür prosesi geliştirilmiştir. Karıştırmalı tank biyoreaktör sistemindeki prosesin, üretimin yedinci günü sıcaklığın 37°C 'den 32°C'ye düşürülmesi ile %83.85 bağlanma potansiyeline sahip, 2.9 g / L titre sağlayan, eşleşen glikozilasyon profilleri ile Orijinatör moleküle etkinlik, güvenlik, biyolojik aktivite, immünojensite, ve stabilite açısından gereken uygunluğu gösterdiği doğrulanmıştır. Sonuçlar, deneysel dizayn stratejilerinin üretime yönelik, kritik kalite özelliklerinin sağlandığı biyoproseslerde ve biyobenzer geliştirme alanında kullanımına ilişkin güvenilirliği, ve uygulanabilirliği açıkça ortaya koymaktadır.