Digitalis türlerinden izole edilecek 3 beta HSD ve 5 beta POR genlerine ait promotorların Arabidopsis thaliana'da analizi

Yüksükotu olarak bilinen Digitalis ferruginea, kardiyak glikozitlerin üretimi için kullanılmaktadır. Progesteron 5β-redüktaz (5βPOR1 ve 5βPOR2) ve 3β-hidroksisteroid dehidrojenaz (3β-HSD) Digitalis türlerinde kardenolidin biyosentez yolundaki önemli anahtar basamak genleridir. Bu çalışmada 3β-HSD, 5βPOR1 ve 5β POR2 promotörleri Digitalis ferruginea'nın genomik DNA'sından İlk kez izole edilip, dizi analizi yapılmıştır. Promoterlerin sekans bilgileri, bu promoterlerin ışık tepkileriyle ilgili bol cis-elementlere sahip olduğunu ortaya çıkarmıştır. 5βPOR1promoter spesifik cis elemanları sirkadiyen ve ısı şokudur. 5βPOR2promoter spesifik düzenleyici elemanlar savunma, stres ve metil jasmonattır. Yara yanıt elementi, 3β-HSDpromoter'da spesifik olarak bulunmuştur. Çiçek dalma transformasyonu ile transform olmuş Arabidopsis bitkilerinde 3β-HSDpromoter :: GUS'un fonksiyonel karakterizasyonu, kotiledonlarda, yeni ortaya çıkan yapraklarda, filiz ve kök vasküler dokularında, trikomlarda, filizlenen apikal meristemde (SAM) ve bitki büyümesi ve gelişim aşamalarında kist hidatodlarda aktivite göstermiştir. Fidelerde% 3 sukroz veya% 2 mannitol bulunduran ortamda yoğun GUS aktivitesi izlenmiştir.. NaCl (150 mM) promoter ekspresyon aktivitesinin mevcudiyetinde downregüle aktivite izlenmiştir. 5βPOR1promoter :: GUS aktivitesi, kök apikal meristem hariç tüm dokularda 5 ve 10 günlük fidelerde en yüksek iken 15 günlük fidelerde azalmıştır. 5βPOR2 promoter :: GUS aktivitesi 5 ve 15 günlük fidelerde kotiledonlarda vasküler dokularla sınırlıydı. 10 günlük fidelerde, kotiledonlarda, kotiledonların vasküler dokularında, hipokotil ve hipokotile bitişik kökte promotör aktivitesi yoğun olarak izlenmiştir. 15 günlük fidelerin hipokotilinde yoğun promoter aktivitesi görülmüştür. Arabidopsis'te promotör sekansları ve fonksiyonel karakterizasyon, genlerin hafifçe düzenlendiğini ve 3β-HSD'nin bitki büyümesinde, gelişiminde ve abiyotik stres toleransında rol oynadığını ortaya koymuştur. Ayrıca, 5βPOR1 ve 5βPOR2 genleri de gelişim aşamaları sırasında normal bitki büyümesinde önemli rola sahiptir.