DNA saflaştırılmasına yönelik bakteriyel kökenli ekstraselüler biyopolimer kompozit kriyojellerin İMAK uygulamaları

Bu çalışmada, DNA'nın etkili bir yolla ayrılması için kullanılan afinite kromatografisi metotları arasında olan ve son zamanlarda yoğun bir uygulama sahası bulan, immobilize metal afinite kromatografisinden (İMAK) yararlanılmıştır. Çalışmada, Fe+3 bağlı EPS-poli(2-hidroksietil metakrilat) kompozit kriyojeller sentezlenmiştir. Bu amaçla, 2-hidroksietil metakrilat (HEMA) monomer olarak, N,Nˈ-metilen-bis-akrilamid (MBAAm) çapraz bağlayıcı olarak, amonyum persülfat (APS)/ N,N,N´,N´-tetrametiletilen diamin (TEMED) başlatıcı/aktivatör olarak kullanılmıştır. Poimerizasyon ortamına ekstraselüler polimerik maddeler (EPS)'in eklenmesinin ardından, karışım 2,5 mL'lik plastik şırıngalara dökülmüş ve -12°C'de polimerizasyona bırakılmıştır. Sentezlenen kompozit kriyojellere, Fe+3 iyonu bağlandıktan sonra, taramalı elektron mikroskobu (SEM) ve şişme testleri ile karakterize edilmiştir. pH, başlangıç DNA konsantrasyonu, iyonik şiddet, akış hızı ve sıcaklığın adsorpsiyon üzerine etkisi araştırılmıştır. En yüksek adsorpsiyon değeri pH 6 asetat tamponunda, 2 mg/mL başlangıç DNA derişiminde, 0,5 mL/dk akış hızında ve 25°C ortam sıcaklığında 39,66 mg/g polimer olarak gözlenmiştir. Aynı zamanda, Fe+3 bağlı EPS-PHEMA kompozit kriyojellere DNA'nın defalarca adsorplanıp desorplanabildiği gözlenmiştir.