Microglia to Neuron Interaction via Exosomal MiR-34a

Mikroglial hücreler Merkezi Sinir Sisteminde (MSS), beyin gelişiminin düzenlenmesinde, hasarların onarılmasında ve nöronal iletişim ağlarının devamlılığında rol alan ekstra-embryonic yolk kesesinden türeyen myeloid hücrelerdir. Merkezi sinir sistemine karşı ölü hücreler, mikroplar, gereksiz sinapslar ve çözünebilir antijenler tarafından tehlike sinyalleri aldıklarında, bunları uzaklaştırırlar ve homeostaziyi sürdürürler. Mikroglial hücreler proinflamatuar sitokinlerin birincil kaynağı oldukları için nöroinflamasyona aracılık ederler ve geniş spektrumlu hücresel cevapları düzenlerler. Ekzozomlar birçok hücre tipi tarafından salgılanan membranla çevrili veziküllerdir. MikroRNA (miRNA), mRNA, protein ve DNA içeren kargolarını alıcı hücrelere taşıyarak hücre-hücre iletişiminin düzenlenmesinde rol alırlar. Mikrogliadan elde edilen ekzozomlar nörit fazla büyümesini tetikleyerek nöral yenilenmeyi teşvik eder ve nörolojik hastalıklarda rol alabilirler. Ekzozomlarda bulunan miRNAlar alıcı hücrelerin içine iletildiklerinde fonksiyonel role sahiplerdir ve anahtar fonksiyonel elemanlar oldukları düşünülür. Bu tezin amacı mikroglial hücrelerin nöronal hücreler üzerindeki etkisini miR-34a aracılığıyla incelemektir. Bu amacın gerekliliği olarak, SH-SY5Y nöronal hücre hattı hidrojen peroksitin farklı konsantrasyonlarıyla muamele edilecek ve sitotoksik etkisi LDH (Laktat Dehidrojenaz) ve PI (Propidyum İyodür) görüntülemeyle değerlendirilecektir. Sonrasında, hidrojen peroksitin nörit büyümesi üzerindeki sitotoksik etkisi hücre başına düşen çıkıntı sayısının hesaplanmasıyla belirlenecek ve nörit uzunlukları üzerindeki etkisi ise analiz edilip ortalama çıkıntı uzunluğu olarak ifade edilecektir. Ardından, HMC3 mikroglial hücre hattı miR-34a mimikle transfekte edilecek ve ekzozomları SH-SY5Y hücrelerine verilecektir. miR-34a'nın SH-SY5Y hücreleri üzerindeki etkileri nöroproteksiyon yönünden belirlenecektir.