Pifitrin alpha tedavisi ile HSC genleşme derece sitotoksik ve genotoksik bariyerlerin kaldırılması

Hematopoietik kök hücreler (HSC'ler) çok çeşitli kan hastalıklarının tedavisinde uygulanmaktadır. Bununla birlikte, sınırlı sayıda ve durgunluk özelliği kök hücre tedavisinde kullanılmalarını zorlaştırmaktadır. HSC'lerin ex vivo genişlemesi ve çoğalmasını sağlamak adına küçük moleküllerle çeşitli çalışmalar sürdürülmektedir. Bilindiği üzere; P53'un genetik inhibisyonunun, hematopoietik kök hücrelerin (HSC'ler) çoğalmasına yol açtığı gösterilmiştir. Pifithrin-aplha küçük moleküllü bir bileşik ve p53 fonksiyonunun önleyicisidir ve genotoksik ajanlara karşı önlem olduğu bilinmektedir. Bu çalışmada; pifithrin-aplha molekülünün HSC hücreleri üzerindeki etkileri araştırıldı. Bu amaçla, fare HSC'leri, manyetik soy soyutlama yöntemi ile zenginleştirildi. İnsan umbilikal kordon kanı (UCB) ve kemik yapılı (BM) mononukleer hücreler histopak yoğunluk gradient santrifuju ile izole edildi. Hücreler hazırlanan HSC medyası ile uygun koşullarda kültür edilirken kontrol olarak DMSO tedavisi kullanıldı. Pifithrin-aplha küçük molekülü ile yedi günlük inkübasyondan sonrasında fare HSC'leri lin (-), sca1, c-kit, ÇD34 markörleri için analiz edildi. Aynı şekilde insan HSC'leri için ise CD34 ve CD133 markörleri için analiz edildi. FACS ile saflaştırılmış fare LSK hücrelerinin seçilen en uygun doz molekül ile kuluçkaya yatırılmasını takiben hücre döngüsü analizi ve apoptoz analizi yapılmıştır. Aynı zamanda, İnsan Umbilikal Ven Endotel Hücrelerini (HUVEC) ve İnsan Dermal Fibroblast (HDF) ve yağ dokusundan elde edilen MSC'ler üzerinde de etkisi incelenmiş ve olumsuz bir etki göstermemiştir. Pifithrin-aplha küçük molekülü, LSK (lin-sca1 + c-kit +) ve insan UCB HSC hücrelerinde 3 kat artışa neden olmuştur. Benzer şekilde, insan BM HSC hücrelerinde 2 kat artışına neden olmuştur.Aynı zamanda, tavuk HSC izole edilip, yüzey marker taraması gerçekleştirildi. Böylece; kuş gribi gibi hastalıkların araştırılması ve insan HSC'lerinde oluşan etkilerinin önlenmesi için olanaklar araştırıldı.Sonuç olarak, bu molekülün ex vivo HSC genişlemesini ve tedavi verimliliğini artırmak için kullanılabileceği düşünülmektedir.