In vitro regeneration, biological activities and phenolic composition of Astragalus gymnolobus Fischer, an endemic plant

Astragalus, Fabaceae ailesine ait yaklaşık 3000 türü kapsayan geniş bir cinstir. Astragalus türleri halk arasında antibakteriyel, antiviral, antifungal, antioksidant, antikanser, karaciğeri koruyucu, yara iyileştirici, antidiyabetik ve idrar söktürücü olarak kullanılmaktadır. Astragalus gymnolobus Fischer (gevenotu) endemik, bodur, yastık formunda çalılardır. A. gymnolobus için güvenilir bir bitki rejenerasyonu protokolü geliştirilmiştir. İki farklı eksplant (yaprak ve yaprak sapı) çeşitli bitki büyüme düzenleyicisi kombinasyonlarının bulunduğu MS (Murashige and Skoog) ortamı üzerinde kültüre alınmıştır.Yaprak eksplantları, yaprak sapı eksplantlarından daha fazla sürgün oluşturmuştur. En iyi sürgün oluşumu 0.5 mg/l TDZ (thidiazuron) ile yaprak eksplantlarından elde edilmiştir. En iyi kallus oluşumu 3.0 mg/l BA (benziladenin) ve 0.5mg/l 2,4-D (2,4-diklorofenoksiasetik asit) ile yaprak eksplantlarından elde edilmiştir. Rejenere olmuş sürgünler, farklı konsantrasyonlarda IAA (indol-3-asetik asit), IBA (indol-3-bütrik asit), 2.4-D veya NAA (naftalen asetik asit) içeren ortamlara konulmuştur. Ancak, rejenere olmuş sürgünler ile köklenme gözlemlenmemiştir. Toplanmış kalluslar A. gymnolobus bitkisinin biyolojik aktivite çalışmaları için kullanılmıştır. A. gymnolobus bitkisinin in-vitro yetiştirilmiş kallus ve doğada yetişen yaprak parçaları ile antibakteriyel ve antioksidant aktivite, toplam fenol ve flavonoid içeriği ve fenolik bileşenlerin HPLC (yüksek performanslı sıvı kromatografisi) analizi değerlendirilmiştir. A. gymnolobus bitkisinin su ve methanol özütlerinin antibakteriyel aktivitesi disk difüzyon metodu (Kirby-Bauer) ile belirlenmiştir. Genellikle, doğada yetişen yapraklar, in-vitro yetiştirilen kalluslardan daha iyi antibakteriyel aktivite göstermiştir. A. gymnolobus bitkisinin metanol özütlerinin serbest radikal süpürme gücü DPPH (2,2-difenil-1-pikrilhidrazil) metodu ile belirlenmiştir. En iyi antioksidant aktivite 25 μg/ml konsantrasyonunda (91.47 %) doğada yetişen yaprakların metanol özütlerinde gözlemlenmiştir. Folin-Ciocaltaeu methodu kullanılarak toplam fenol içeriği ve alüminyum klorid (AlCl3) kolorimetrik methodu kullanılarak toplam flavonoid içeriği belirlenmiştir. Doğada yetişen yaprakların metanol özütleri, in-vitro yetiştirilen kalluslardan daha fazla fenol ve flavonoid içermektedir. Doğada yetişen yaprakların fenolik bileşenlerinin konsantrasyonu HPLC analizi ile in-vitro yetiştirilen kalluslardan yüksek bulunmuştur.