WNT/beta-catenin signaling pathway activation in epithelial cancers

Karaciğer Kanserinde Wnt yolaklarını çalışırken, öncelikle insan hepatomahücre hatlarını hepatositlere özel biyojik işaretler (marker) kullanarak özelleşmiş veaz özelleşmiş olarak sınıflara ayırdık. Wnt/β-katenin sinyal aktivitesi TCF/LEFraportör testi yapılarak ölçüldü. Standart Wnt/β-katenin sinyalleri, tamamenözelleşmiş hücre hatlarının 80%'inde, ve az özelleşmiş hücre hatlarının %14'ündesürekli aktifti. Bunun yanısıra, mutant S33Y β-katenin'in ektopik sentezi, tamamenözelleşmiş HCC hücre hatlarında güçlü standart Wnt/β-katenin aktivitesine yolaçarken, az özelleşmiş HCC hücre hatlarında bu etki görülmedi. Başlıca Wnt sinyalelemanları üzerine RT-PCR ile yapılan kapsamlı araştırmalar, birçok Wnt ligandları,Frizzled reseptörleri, ko-reseptörler ve TCF/LEF faktörlerinin gereğinden fazla vebirbirinin yerine geçebilecek şekilde sentezlendiğini göstermiştir. Buna karşılık,standart Wnt sinyalini inhibe eden Wnt5A ve Wnt5B ligandları, seçici olarak azözelleşmiş HCC hücre hatlarında sentezlenmektedir. Bizim gözlemlerimize görestandart Wnt/β-katenin sinyali, tamamen özelleşmiş HCC hücrelerinde aktif, fakat azözelleşmiş HCC hücrelerinde baskılanmış durumdadır. Bu nedenle, standart Wnt/β-katenin sinyali HCC hücrelerinde çift rol oynamaktadır.Meme Kanserinde Wnt yolaklarını çalışırken, ölümsüzleştirilmiş normal insan memeepitel hücreleri (HMECs), 6 meme kanser hücre hattı (BCCL) ve 14 primer memetümörü kullanarak, Wnt sinyal moleküllerinden, 19 Wnt ligandı, 10 frizzledreseptörü, 2 LRP ko-reseptörü ve 4 Lef/TCF transkripsiyon faktörünün kapsamlıvekspresyon analizleri yapıldı. BCCL, FZD10 hariç bütün frizzledları, LRP5/6 veLef/TCF'leri sentezliyor/aşırı sentezliyordu. Ayrıca WNT4, WNT7B, WNT8B,WNT9A ve WNT10B de aşırı sentezleniyor, fakat WNT1, WNT2B, WNT3, WNT5A,WNT5B ve WNT16 sentezi birçok BCCL de kayboluyor ya da düşüyordu. Wntekspresyonun, Normal İnsan Meme Hücre Hattı ile kıyaslandığında, Meme KanserHücre hatlarındaki çekirdek β-katenin birikmesi ve cyclin D1 indüksiyonu ile ilintiliolması standart Wnt sinyali kanserli hücrelerde yeniden aktive edildiğinigöstermekteydi. Bunun yanı sıra, FZD1, WNT-4, WNT7B, WNT8B, WNT9A veWNT10B gibi standart Wnt sinyali ile ilişkili genlerin ekspresyonu Primer MemeTümörlerinde arttığı halde, standart olmayan WNT5A ekspresyonu baskılanmaktaydı.Bu sonuçlar otokrin standart Wnt sinyalinin insan meme karsinogenezi ile ilişkiliolduğunu göstermekteydi.Bizim çalışmamız, Wnt yolakının karaciğer ve meme kanserleri ile ilgili olan farklıilşkisi üzerine güçlü kanıtlar sunmaktadır. Karaciğer kanserinde, Wnt yolakınınaktivitesi HCC hücre hatlarının özelleşmesi ile ilgili gözükmektedir. Bunun yanı sıra,sonuçlarımız Wnt yolakının tamamen özelleşmiş HCC hücre hatlarında aktif, azözelleşmiş olanlarda baskılanmış durumda olduğunu göstermiştir. Buna karşılık,Meme Kanser Hücre hatlarıyla yapılan Wnt çalışmaları farklılıktan ziyadebenzerlikler göstermiştir. Çalışmamız, Meme Kanser Hücre hatlarında, Wntligandlarının mRNA ekspresyon profili ile cyclin D indüksiyonu ve çekirdek β-katenin proteininin birikmesi arasındaki kayda değer ilişkiyi ortaya çıkartmıştır.Sonuç olarak, Wnt sinyali iki tip kanserle de ilişkili olmasına karşın, karaciğer vememe kanserinde farklı roller oynamaktadır. Daha da ilgi çekici olanı, Wnt sinyali,HCC gibi aynı tip kanserde bile, hücrenin özelleşme durumuna göre farklı aktivitelergösterebilmektedir.vi