The effects of different dietary interventions and ageing on DNA methylation levels of SIRT1 in the brain of mammary tumour mouse model

Sirtuin 1 (SIRT1), gen anlatımı, yaşam süresinin belirlenmesi, stres yanıtı ve apoptoz gibi belirli hücresel süreçlerde hücresel homeostazı koruyan bir NAD+ bağımlı deasetilazdır. Kalori kısıtlaması (KK) gibi diyet müdahaleleri SIRT1 aktivitesini modüle eder ve memelilerde yaş ve metabolizma hızında artışa neden olur. SIRT1, yaşlanma sırasında kötüleşen nörolojik süreçlerin korunmasında olumlu etkiye sahiptir. Bu çalışmanın amacı farklı şekillerde uygulanan kalori kısıtlamasının ve yaşlanmanın fare beynindeki Sirt1 DNA metilasyonu üzerindeki etkisini araştırmaktır. Yaşlanma ve diyet müdahalelerine bağlı Sirt1 gen metilasyonunu araştırmak için 10 haftalık dişi C57BL/6 fareler, ad libitum, sürekli kalori kısıtlaması(SKK) (AL grubuna kıyasla yüzde 15 kalori kısıtlaması) veya aralıklı kalori kısıtlaması (AKK) (döngüsel bir şekilde üç haftalık AL ve AL grubuna kıyasla bir hafta yüzde 60 kalori kısıtlaması) ile beslendi. Pyrosequencing tekniği farelerin beyinlerinden izole edilen DNA'lardaki Sirt1 metilasyon seviyelerini ölçmek için kullanıldı. Sirt1 mRNA ekspresyonu, RT-PCR ile ölçülürken, protein seviyeleri western-blot ile karşılaştırıldı. Sirt1 gen ve protein ekspresyonunda ve DNA metilasyon seviyesinde yaşlanmaya bağlı olarak istatiksel olarak anlamlı bir fark gözlemlenmedi. Farklı kalori kısıtlaması uygulanan gruplar arasındaki Sirt1 ekspresyonu ve DNA metilasyon seviyelerinde değişiklik tespit edilmedi. DNA metilasyon seviyesi ile Sirt1 mRNA ekspresyonu arasında istatiksel olarak anlamlı negatif bir korelasyon bulundu. Bu sonuçlar, yaşlanma ile hücrelerde SIRT1 miktarındaki azalmanın proteomik seviyedeki düzenlemelere veya diğer epigenetik mekanizmalara bağlı olabileceğini düşündürmektedir. DNA metilasyonu, diyet ve yaştan bağımsız olarak Sirt1 ekspresyonu üzerinde düzenleyici bir etkiye sahiptir.