H2O2 ile indüklenmiş h9c2 kardiyomiyosit hücrelerinin mezenkimal kök hücre uygulaması sonrası aquaporin seviyelerinin araştırılması

Organizmalarda yaşamın devamlılığı, hücre içi su homeostazına büyük ölçüde bağlıdır. Su kanalları olarak bilinen aquaporinler (AQP'ler), bu düzenlemede önemli bir rol oynar. Hücre zarları aracılığıyla su taşınmasının yanı sıra aquaporinler, gliserol gibi küçük nötr moleküllerin hücreye girmesini sağlayarak hücreler için bir enerji kaynağı oluşturur ve su dengesini düzenleyerek çeşitli hastalıkların tedavisine katkıda bulunabilir. Aquaporinlerin ifadesi, fizyolojik ve patolojik durumlarda değişiklik gösterir; özellikle miyokardiyal ödeme bağlı kalp anomalilerinde önemli bir rol oynar. Mezenkimal kök hücreler (MKH'ler), kanser tedavisi ve çeşitli dokuların onarımı gibi kullanılan tedavi yöntemlerinde yer alır. Bu tez çalışmasında, H9c2 sıçan kardiyomiyosit hücre hattı kullanılmaktadır. Bu hücrelere H2O2 uygulaması yapılarak stres koşulu indüklenmektedir. Stres yanıtını değerlendirmek için, H2O2 uygulaması yapılmayan H9c2 hücreleri ile H2O2 uygulaması yapılan H9c2 hücreleri arasında reaktif oksijen türü (ROS) seviyelerini karşılaştırılmıştır. Stres koşulunun indüklenmesinden sonra, H9c2 hücreleri sıçandan izole edilen MKH'lerle ko-kültüre edilerek tedavi modeli yaratılmıştır. Daha sonra kardiyak aquaporinlerin (AQP1 ve AQP7) ifadelerindeki değişimler, kantitatif gerçek zamanlı PZR, western blot yöntemi ve immunofloresan boyaması ile gözlemlenmiştir. Tez çalışmasından elde edilen sonuçlar doğrultusunda H2O2 uygulaması yapılan hücrelerde ROS üretiminin arttığı doğrulanmış ve ardından AQP1 ve AQP7 ifadelerindeki artışlar belirlenmiştir. AQP1 ve AQP7 ifadelerinin stres koşulu indüklenen grupta anlamlı derecede arttığı tespit edilmiştir. Bunun yanı sıra stres koşulu indüklenen H9c2 hücrelerinin MKH ile ko-kültürasyonu yapıldığında ise AQP1 ve AQP7 ifadelerinin azaldığı ve tedavi modelinin işe yaradığı gözlemlenmiştir. Bu tez çalışmasından elde edilen sonuçlar kardiyak aquaporinlerin terapötik hedefler olarak kullanılabileceğini desteklemekle birlikte MKH'lerin tedavi edici özelliklerinin aquaporinler üzerindeki etkisini göstermiştir. Yapılan çalışmalar kalp anomalileri durumda aquaporinlerin rolü üzerinden kalp patolojilerini aydınlatmayı ve tedavi stratejilerini yönlendirmeyi amaçlamaktadır.