Hemoglobin A1c'nin tayini için yeni bir immünoassay yönteminin geliştirilmesi

Bu tez kapsamında, diabetes mellitus'un(DM)tanısı ve tedavisinde altın parametre olarak nitelendirilen, hemoglobin A1c(HbA1c, için Zaman Gecikmeli Floroimmmünoassay(TR-FIA) tekniğine dayanan yeni bir immünoassay yöntemi geliştirildi.Bu amaçla, ilk olarak 4,4′′-Bis4,4,5,5,6,6,6-heptafloro-1,3-dioksiheksil)-o-terpenil-4′-sülfonil klorür (BHHCT) ligandının Eu(III)kompleksi oluşturuldu ve bu kompleksin çalışmalarda etiket olarak kullanımı test edildi. Çalışmanın ikinci kısmında, antikor miktarları, antikor-antijen etkileşim süreleri, Eu(III) etiket seyreltme oranı gibi çalışma koşulları optimize edildi ve uygun immünoassay prosedürü oluşturuldu. Optimize edilen koşullarda hazırlanan immunoassay prosedürü ile HbA1c molekülü için çalışma aralıkları 0,05-9200 ng/mL ve % 0-25 olarak belirlendi. Bunun yanında yöntemin inter asaay ve intra assay tekrarlanabilirliği çalışıldı ve yöntemin oldukça tekrarlanabilir olduğu sonucuna varıldı. Tezin son kısmında ise, hazırlanan immünoassay prosedürünün analitik uygulanabilirliği kan numunelerinde % HbA1c tayini yapılarak araştırıldı. Elde edilen sonuçlar referans bir yöntem olan ELISA ile elde edilenlerle karşılaştırıldı ve % BSS ve % geri kazanım değerleri hesaplandı.