Senescence and immortality genes as markers of hepatocellular carcinogenesis

Hücre yaşlanması tümör baskılayıcı bir mekanizmadır ve ölümsüzlük, neoplas-tik dönüşümü kolaylaştırır. Her iki mekanizma da hepatoselüler karsinom (HCC)gelişimi ile yakından ilişkilidir. Biz, HCC'de hücre yaşlanması ve ölümsüzlügünüiki açıdan çalıştık. Önce, ZEB2 (Smad ile etkileşen protein SIP1, ZFHX1B)geninin HCC'deki yaşlanma ile ilişkili rolünü inceledik. Sonra, çalışmamızı, hep-atoselüler kanser ile ilişkili yaşlanma ve ölümsüzlük gen ağı (SIGN)'nın belirlen-mesi ve analizi yönünde genişlettik. ZEB2, E-kaderin'i baskılar ve tümör metas-tazında ve gelişiminde anahtar rol oynayan, epitel-mezenkimal geçiş (EMT)'yi,indükler. Öte yandan ZEB2, telomer muhafazası ve tümör hücre ölümsüzlügüiçin gerekli enzim, telomeraz ters transkriptaz (TERT)'ı baskılar. Biz, ZEB2'ninhepatoselüler kanserdeki potansiyel anlamını keşfetmek için, in-vivo, in-vitrove in-silico çalıştık. ZEB2 transkriptlerinin doku ifadeleri, HCC lezyonlarında,karaciğer sirozuna kıyasla dereceli olarak azalma gösterdi. Bu ters bağıntı, ZEB2ifadesinin, HCC'nin ilerlemesiyle uyumlu olmadığını akla getirdi. Sonra, HCChücrelerinde ZEB2'nin azaltılması ve artırılmasının in vitro etkilerini çalıştık.Özgün bir ZEB2-shRNA ifade vektörü ile kararlı şekilde transfekte edilen Huh7klonları, koloni oluşumunda ve çoğalmada artış gösterdiler. Karşıt şekilde, ZEB2ifade vektörü ile transfekte edilen Hep3B hücrelerinin, yaşlanma ilişkili ß -galaktozidazaktivitesi ile, kalıcı hücre döngüsü hapsine girdiklerini gördük. ZEB2 ile indüklenenyaşlanma hapsi, TERT ifadesinin baskılanması ve eşlik eden siklin-bağımlı kinazengelleyici p21Cip1'in ifadesindeki artış ile bağıntılı idi. ZEB2'nin geçici ifadesi,p21Cip1 ifadesindeki artışı indüklemedi. Son olarak, ZEB2'yi aşırı ifade edenHep3B ve A431 klonlarının, in-vitro kültürde dereceli olarak azalması ile ZEB2aşırı ifadesinin, kanser hücrelerinin in-vitro yaşamı ile uyumlu olmadığı sonucunavarıldı. Bu gözlemler, ZEB2 geninin, EMT'deki rolünün dışında, HCC hücrebüyümesi ve yaşamasında negatif rol oynadığını düşündürdü.Diğer çalışmamızda SIGN imzasını oluşturmak için, yaşlanmaya program-lanmış ve ölümsüz HCC hücrelerinden gelen gen ifade datasını, siroz ve HCCdokularından gelen data ile birleştirdik. SIGN imzası normal karaciğer, siroz, dis-plazi ve HCC lezyonlarını doğrulukla sını ? andırdı ve yaşlanmadan ölümsüzlüğedönüşümün, ilk olarak displaziden erken HCC'ye geçişte gerçekleştiğini belirledi.Bu dönüşüm, tümör ilerlemesine de katkıda bulunur. Yaşlanmadan ölümsüzlüğedönüşüme, hepatik geri başkalaşım ile ve hücre çoğalması, kromozom değişimi veDNA hasar yanıtı genlerindeki ifade artışı eşlik etti. Bu nedenle, HCC ölümsüzlüğü,kök hücre/öncü hücre benzeri özellikler ile yakından ilişkilidir. Son olarak, DNAhasar kontrol noktası ve DNA tamir genlerindeki artış ile, tümör başlangıcı veilerlemesi arasında ilişki bulduk. Bu genler, HCC'nin engellenmesinde ve ter-apisinde potansiyel hede ? er olabilirler.