Characterization of extracellular purinergic signaling components in colorectal carcinoma

Kolorektal kanser, kanser-ilişkili ölümlerin en büyük ikinci sebebi olan ve diğer kanserler arasında üçüncü en çok tanı konulan heterojen bir hastalıktır. Pürin ve pirimidinlerin enerji transaksiyon ve nükleik asit sentez reaksiyonları gibi hücre içi işlevleri oldukça iyi bilinmektedir. Buna karşın pürinerjik sinyalizasyon bileşenlerinin kanser başlangıcı ve ilerlemesindeki hücre dışı rolleri yeterince belirlenememiş olmakla birlikte her geçen gün daha çok öne çıkan bir hal almaktadır. Hücreler arası pürinerjik sinyal yolağı, doku ve bağlam bağımlı olarak tümörlerde büyümeyi teşvik edici veya büyümeyi inhibe edici etki gösterebilmektedir. Bunun yanında, bu bileşenlerin kolorektal kanserdeki etkilerine dair olan bilgi birikimi oldukça sınırlıdır. Dolayısıyla, bu çalışmamızda, ATP degradasyon süreçlerinde rol oynayan enzimlerden biri olan PSE002 ve adenozin reseptörlerinden biri olan PSC003 gibi çeşitli ekstrasellüler pürinerjik sinyalizasyon komponentlerinin kolorektal kanserdeki etkileri üzerine yoğunlaşılmıştır. Bu komponentlerin kolorektal kanserdeki etkilerinin incelenebilmesi için ayrı ayrı olmak üzere CRISPR/Cas9 yöntemi kullanılarak stabil knockout hücre hatları oluşturulmuştur. Buna ek olarak bu genler RNA interferans ile geçici olarak da susturulmuştur. Bu susturulmuş kolorektal karsinoma (KRK) hücre hatları kullanılarak yapılan çalışmalarda PSE002 ve PSC003'nin susturulmasının hücrelerin proliferasyonunu ve yüzeyden bağımsız olarak büyüme oranlarını in vitro olarak arttırdığı gözlenmiştir. Buna ek olarak, bu genlerin KRK hücrelerindeki kaybı mezenkimal hücre yüzey belirteçlerinin ekspresyon seviyesini artırıp epitel-mezenkimal geçişi indüklemiştir. Dahası, KRK hücre hattı kullanımı ile oluşturulan ksenograft modelleri in vitro dataları desteklemiş ve tümör büyümesini önemli derecede teşvik etmiştir. İlginç olarak, PSE002-susturulmuş hücre hatları ile görülen etkiler, PSE002 farmakolojik inhibitor kullanımının ardından doğrulanamamıştır. Bunun aksine, PSC003-seçici antagonisti kolorektal kanser hücre hatlarında hücre büyümesini normal veya hipoksik koşullarda desteklemiştir. Sonuç olarak, bulgularımız hücreler arası adenozin sinyal yolağına yeni bir bakış açısı sağlamakta ve bu hedef genlerin tümör baskılayıcı genler olarak fonksiyon gösterdiğini, kolorektal kanseri hedef alan terapötik stratejiler belirlenirken bu bilgilerin de göz önüne alınması gerektiğini işaret etmektedir.