Characterization of a novel IRE1 substrate PACT and interacting miRNAs

RNA bağlayıcı protein, çift sarmallı RNA'ya bağlı protein kinaz aktivatörü A (PACT), RNA kaynaklı susturma kompleksinin (RISC), çekirdeklenmesi için membranöz bir platform sağlayarak merkezi bir rol oynayan Endoplazmik Retikuluma (ER) tutturur ve mikroRNA (miR) aracılı translasyonel baskıda rol alır. Önceki çalışmalar, ER stresin PACT fosforilasyonuna yol açarken aynı anda birçok miR'in ifadesinde değişikliklere neden olduğunu göstermiştir. Bu tez bulguları, PACT'ın hem ER stress altında hem de bazal koşullarda ER bağlantılı Inositol gerektiren enzim-1 (IRE1), (çift endoribonükleaz (RNaz) ve kinaz) tarafından fosforile edildiğini gösterir. ER stresin aktive ettiği IRE1 RNaz fonksiyonu, katlanmamış protein tepkisini (UPR) tetiklerken, fizyolojik koşullarda bazal IRE1 kinaz aktivitesinin işlevi veya hedefleri bilinmemektedir. Bu tezin bulguları fosforile edilmiş PACT'ın, mitokondriyal biyogenezin (mitobiyogenez) kilit düzenleyicilerinin ekspresyonunu baskılayan olgun miR-181c seviyelerini düzenlediğini göstermektedir. IRE1 ile fosforilasyon, PACT aracılı mitobiyogenez ve mitokondriyel oksijen kullanımının baskılanması için gereklidir. Farelerde kısmi PACT eksikliği, hücre kültüründe olduğu kadar in vivo olarak da kahverengi adipoz doku aktivasyonu sırasında daha güçlü mitobiyogeneze yol açar. Ayrıca, kardiyopulmoner baypas kaynaklı iskemi/perfüzyon hasarı, insan kalp dokusunda PACT protein ekspresyonunu azaltırken aynı zamanda mitokondriyal biyogenezi indükler. Toplu olarak, bu bulgular PACT-miR181c sinyal ekseninin mitokondriyal biyogenez ve enerjinin önemli bir düzenleyicisi olduğunu göstermektedir.