Kestaneden (Castanea sativa) saflaştırılan lipaz enziminin çeşitli taşıyıcılara immobilizasyonu

Lipazlar, sistematik adı triaçilgliserol açilhidrolaz olup, sulu ortamda triaçilgliserollerin hidrolizini katalizleyerek di- ve monoaçilgliserollere ve gliserole dönüştürebilen, susuz ortamda ise ester bağlarını oluşturabilen enzimlerdir. Enzimleri kimya ve biyoteknoloji alanında daha çekici hale getirebilmek için özellikle son 30 yıl içinde enzim immobilizasyonu üzerine çalışmalar yoğunlaşmıştır. İmmobilize enzimlerin endüstride, birçok alanda kullanımının yaygınlaştığı görülmektedir. Bu çalışmada, kestane (Castanea sativa) tohumundan ilk kez saflaştırılan lipaz enziminin çeşitli taşıyıcılara adsorpsiyon, kovalent ve iyonik bağlama yöntemleri ile immobilize edilmesi ve kinetik özelliklerinin incelenmesi amaçlanmıştır. İmmobilize edilen lipaz enziminin kinetik özellikleri incelenerek serbest lipaz enzimi ile kıyaslaması yapılmıştır. Saflaştırılan lipaz çeşitli taşıyıcılar üzerine adsorpsiyon, kovalent ve iyonik bağlama yöntemleri ile immobilize edildi. Protein miktarı Lowry yöntemine göre, lipaz esteraz aktivitesi ise Erlanson yöntemine göre tayin edildi. Kestaneden saflaştırılan lipazın optimum pH'sının 10, optimum sıcaklığının 30°C olduğu bulundu. Kestane lipazının çeşitli taşıyıcılar (Silikajel, deniz kumu, Amberlite IRA-900, alumina, cam boncuk) üzerine immobilize edilerek immobilize lipazların optimum pH, optimum sıcaklık, optimum reaksiyon süresinin tayini gibi kinetik özellikleri de incelendi.