Kumarinlerin subkritik su kromatografisi ile ayrılması

Bu çalışma iki kısımdan oluşmaktadır. Çalışmanın birinci kısmında, yeni dizayn kromatografi sistemi kullanılarak, kumarin, vanilin ve etil vanilin bileşiklerinin subkritik su kromatografisi ile ayrılması araştırılmıştır. Kromatografik ayrımlar, Waters XTerra MS C18, Zorbax RRHD Eclipse Plus, Zorbax SB-Phenyl, Zorbax SB-C18, and Waters XBridge C18 kolonları içeren beş farklı kolon kullanılarak gerçekleştirilmiştir. Sıcaklığın artmasıyla birlikte çalışılan üç bileşiğinde alıkonma zamanları kısalmıştır. Çalışılan beş farklı kolon içinde Zorbax SB-Phenyl ve Zorbax SB-C18 iyi sonuçlar vermesine rağmen, en iyi ayrım Waters XBridge C18 kolonunda elde edilmiştir. Kumarin, vanilin ve etil vanilin bileşiklerinin subkritik su kromatografisi ile ayrımları 100 ile 200 °C arasında, hem sabit hem değişken akış hızlarında gerçekleştirilmiştir. Sıcaklığın, alıkonma faktörüne etkisi Van't Hoff eşitliği ile incelenmiştir. Çalışmanın ikinci kısmında, subkritik su kromatografisinde kolon dolgu materyali (sabit faz) olarak kullanılacak olan Poli(HEMA-MAH) (PHEMAH) (poli(hidroksietil metakrilat-N-metakriloil-(L-histidin)-metilester) mikroküreleri sentezlenmiştir ve yüksek sıcaklıkta kararlılık ve dayanıklılık testleri yapılmıştır. Bu moleküller yüksek sıcaklıkta kararlılık ve dayanıklılık gösterebilmektedir. Sentezlenen bu kolon dolgu maddesi ile kumarin, vanilin, etil vanilin, 6-metil kumarin ve 7-metil kumarin bileşiklerinin ayrılması 125 ile 200 oC arasında gerçekleştirilmiştir. Metanol/Su karışımı ( %2-97 ve %5-94) mobil faz olarak kullanılmıştır. En iyi ayrım yüksek sıcaklıkta %5-94 metanol/su oranında gözlenmiştir.