Manyetik silika partiküllerle manyetik alan varlığında boya afinite temelli albümin saflaştırılması

İnsan serum albümini dolaşım sisteminde en fazla bulunan proteindir. Kanın ozmotik basıncının ayarlanması, safra asitleri, bilirubin, uzun zincirli yağ asitleri, amino asitleri, steroidler, metal iyonları ve ilaçlar gibi çok sayıda endojen ve eksojen maddenin taşınması, dağıtılması ve metabolizması gibi pek çok fizyolojik işlevi yerine getirir. Aşırı kan kaybı ve böbrek rahatsızlığı ile protein kayıpları durumunda tedavi amaçlı kullanılır ve kan türevli temel ürünlerden bir tanesidir. Plazmadan saflaştırma için genellikle Cohn fraksiyonlama yöntemi kullanılır. Ancak bu yöntem seçici değildir ve protein denatürasyonuna neden olabilir. Proteinlerin saflaştırılması için boya ligand adsorbentler, basit, hızlı ve ucuz ayırma olanağı sağladıkları için tercih edilirler ve tek seferde 20-80 kat saflaştırma ve ön işlem olmaksızın ham özütten yüksek oranda geri kazanım sağlayabilirler. Bu çalışmada manyetik silika partiküllerle albümine ilgisi bilinen Cibacron Blue F3GA ligand olarak bağlanmış ve manyetik sistemde albümin saflaştırması gerçekleştirilmiştir. Spesifik yüzey alanı 222 m2/g olan silika partiküllerdeki magnetit varlığı ESR ve VSM yöntemleri ile gösterilmiş ve adsorbentin spektroskopik yarılma çarpanı, g, değeri 2.3153 olarak hesaplanmıştır. Manyetik partiküllere bağlanan Cibacron Blue F3GA miktarının, boya derişiminin artırılması ile arttığı elementel analiz yöntemi ile belirlenmiş ve boyanın yapıya kovalent olarak bağlandığı FTIR ile gösterilmiştir. Farklı koşullarda gerçekleştirilen HSA adsorpsiyonu çalışmalarında en yüksek adsorpsiyonun pH 5.5'de 27.82 mg/g olarak gerçekleştiği ve 3.0 mg/mL HSA derişiminde plato değerine ulaştığı gözlenmiştir. Sıcaklık ve tuz derişiminin artmasının HSA adsorpsiyonunu azaltıcı yönde etkisi olduğu gösterilmiştir. Yapılan hesaplamalar boya bağlı manyetik partiküllere HSA adsorpsiyonunun Langmuir adsorpsiyon izotermine uyduğunu göstermiştir. Kinetik hesaplamalar adsorpsiyonun kimyasal olarak gerçekleştiğini göstermiştir. Desorpsiyon ajanı olarak 1.0 M NaCl çözeltisi kullanılmış ve 10 kez tekrarlanan adsorpsiyon-desorpsiyon işleminin ardından adsorbentin kapasitesinde yalnızca %5 oranında bir azalma olmuştur. Yapay plazmadan yapılan adsorpsiton çalışmalarında ise albümin adsorpsiyonu 48.6 mg/g'dır ve plazmadan toplam protein adsorpsiyonunun %97'si albümin olarak gerçekleşmiştir.