Calendula arvensis L.'nin In Vitro mikroçoğaltımı ve biyolojik olarak aktif bileşenlerin belirlenmesi

Bu çalışma Calendula arvensis bitki bölümleri arazide yetişen bitkilerin tepe noktaları, büyüme nodları doku kültürü teknolojisi kullanılarak hedef bitkiden üretmeyi içermektedir. Ayrıca büyüme düzenleyicileri olan 6-Benzylaminopurine (BA) ve kinetin (KIN)'nin farklı konsantrasyonlarda bitki büyümesine, hücre çoğalmasına etkileri ve farklı 2,4-D konsantrasyonlarında yapraklardan kallus elde edilmesini incelemektedir. Sterizilasyon için alkol ve sodyum hipoklorit (NaClO) ile testler yapılmıştır. Sonuç olarak, 230 dakika boyunca %70'lik etanol ve 20 dakika boyunca %10'luk NaClO kullanımı etkili bir sterilizasyon için uygun bulunmuştur. 8 hafta sonrasında 0,5 mg/L BA ile muamele edilmiş nodlardan büyüyen bitkilerin dal/bitki kısımlarındaki dal büyümesi 2.2 cm olarak en yüksek oranda ölçümlenmiştir. 0.5 mg/L BA ile muamele edilmiş MS ortamındaki doku kültürlerinden elde edilen bitkilerde 8 hafta sonra dal/bitki parçası sayısı 5.5 olmuştur. Hedef bitkilerden 0.5 mg/L içeren besiyerine nod ekimi sonrasında dal/bitki oranı 2.8 olmuştur. 0.2 mg/L KIN eklenmiş MS ortamına ekimi yapılan dokuların dal sayılarının dal/bitki oranı 4.4 olarak en yüksek 8 haftalık bitkilerde saptanmıştır. 2.0 mg/L KIN içeren besiyerinde büyütülen nodlarda 2 ay sonra en yüksek dallanma 4.7 oranı alınmıştır. Arazide yetişen bitkilerin yapraklarından 1.0 mg/L 2,4-D içeren besiyerinde büyütülen kallusların yaş ağırlığı 1.427'dir. En yüksek kallus yaş ağırlığı ise 30 gün sonra 1.5 mg/L 2,4-D içeren besiyerlerine yapraklardan elde edilen dokulardan 1.323 g olarak elde edilmiştir. Farklı seviyelerde brassino asit ilavesi sonrasında 0.05 mg/L olacak şekilde besiyerine eklenen brassino asit kallus büyümesine ve gelişmesinde etkili olmuştur, bu denemede 0.163 g kuru kallus ağırlığı elde edilmiştir. 2 mg/L brassino asit ile hazırlanan ortamda salisilik asit miktarının arttığı 45.1 ppm gözlemlenmiştir. Sonuçlar 2 mg/L brassino uyarıcı konsantrasyonuna sahip besi ortamlarında rutin miktarında artış olduğunu göstermiştir.