MicroRNA mediated regulation of NLRP3 inflammasome in N9 microglia through AMPK-SIRT1 pathway

NLRP3 inflamazomu, doğal bağışıklık sisteminin pro-inflamatuar sitokin yanıtlarını düzenleyen anahtar bileşenlerinden biridir. Aktivasyonu birçok inflamazom-bağlantılı hastalığın altında yatan mekanizmalardandır. Bu nedenle baskılanması birçok hastalığın tedavisinde ve altında yatan patogenizin araştırılmasında önemlidir. Resveratrolün NLRP3 inflamazomunu baskılayıcı etkisi bilinmesine rağmen anti-inflamatuar özelliklerini hangi sinyal yolakları aracılığı ile gösterdiği henüz açıklanmamıştır. Çalışmalar, resveratrolün birçok farklı yolu kontrol etme yeteneğine, kodlayıcı olmayan RNAlar olan 22 nukleotidden oluşan mikroRNAların ifadelerini düzenleyerek sahip olduğunu göstermiştir. Bu tezde, resveratrolün anti-inflamatuar özelliklerini NLRP3 inflamazomu üzerinde AMPK ve Sirt1 yolaklarını mikroRNAlar aracılığı ile düzenleyerek gösterdiği önerilmiştir. Bu çalışmada resveratrolün hücre ölümüne etkisi LDH, WST ve PI teknikleri ile gösterilirken, reaktif oksijen bileşenlerine karşı koruyucu etkisi DCFDA ve MitoSOX yöntemleriyle belirtilmiştir. Farklı dozlarda resveratrolün AMPK ve Sirt1 yolaklarını aktive ettiği protein seviyesindeki anlamlı derecede artış ile gösterilmiştir. Dahası, bu yolakların inhibisyonunun resveratrolün anti-inflamatuar etkisinin NLRP3 bant yoğunluğu üzerinde geri döndürdüğü belirlenmiştir. Bunlara ek olarak yolakların inhibisyonunun, resveratrol ile önceden muamele edilen gruplara göre NLRP3 ve IL-1β seviyesini ve kaspaz-1 aktivitesini arttırdığı gösterilmiştir. Bu sonuçlar resveratrolün NLRP3 inflamazomunu baskılarken AMPK ve Sirt1 yolaklarını kullandığını göstermektedir. Ayrıca resveratrol ile ekspresyon seviyesi azalan miR-155'in AMPK ve Sirt1 yolaklarının inhibisyonu ile regulasyonunun arttığı da belirlenmiştir. Sonuçlarımızın resveratrolün NLRP3 inflamazomunu miR-155'i regüle ederek AMPK ve Sirt1 yolaklarına bağlı olarak baskıladığını göstermektedir. Bildiğimiz kadarıyla, resveratrolün NLRP3 inflamazomunu baskılayan sinyal yolakları ve bunları regüle eden mekanizmaları N9 mikroglia hücrelerinde ilk olarak bu çalışmada gösterilmiştir.